产品介绍

AF555 ECL是将从刺桐（Erythrina Cristagalli）种子中天然提取纯化的刺桐凝集素，与Alexa Fluor 555荧光染料通过成熟的NHS酯共价偶联工艺制备而成的糖链特异性橙红通道标记科研试剂。它完整保留了刺桐凝集素对末端α-D-半乳糖与N-乙酰半乳糖胺糖链的高亲和力识别特性，依托Alexa Fluor 555染料优化的荧光骨架，兼具高摩尔消光系数与的光稳定性，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步透析与尺寸排阻层析去除未反应的游离染料，解决了传统同波段凝集素荧光亮度不足、长时间成像淬灭快的痛点。试剂为橙红色至紫红色冻干品，在中性生理缓冲液中溶解分散性，是555nm波段开展糖链靶向研究的标杆级高亮度工具。

基础参数

中文名称：AF555标记刺桐凝集素，AF555-刺桐凝集素

英文名称：AF 555 ECL，Alexa Fluor555-ECL，AF555-Erythrina Cristagalli Lectin

外观状态：橙红色至紫红色冻干品

荧光光谱参数：最大激发波长555 nm，发射波长565 nm，完美适配532 nm/555 nm激光线与TRITC标准滤光片组

储存条件：-20℃避光密封干燥长期保存，置于干燥环境防潮解，避免反复冻融，复溶后建议分装为单次使用量，操作全程严格避光，防止光照导致荧光猝灭

用途：半乳糖类糖链橙红通道高亮度标记，细胞表面糖萼形态观察，多色荧光共定位实验，糖链微阵列芯片检测

作用机理

AF555 ECL中的刺桐凝集素以天然活性四聚体形式存在，整体分子量约145 kDa，各亚基表面都带有独立的糖结合口袋，通过的氨基酸残基配位，特异性识别并结合样本中末端含α-D-半乳糖或N-乙酰半乳糖胺的糖链结构，对该类特征糖基化修饰具有高选择性。AF555荧光基团通过稳定的共价键锚定在ECL蛋白表面的赖氨酸残基上，标记位点远离蛋白核心糖结合口袋，偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在555nm波长激发下，偶联在蛋白上的AF555基团可发射出明亮的565nm橙红荧光，窄发射带宽大幅降低了与相邻荧光通道的光谱串扰，适配绝大多数常规荧光成像设备。

核心产品优势

AF555 ECL的核心差异化优势集中在555nm波段的高亮度与低串扰综合表现上，相比传统同波段标记的同类凝集素，AF555染料的摩尔消光系数高，荧光亮度显著优于传统罗丹明类染料，同时窄发射带宽让它与绿光、远红光通道的光谱重叠度极低，在多色实验中几乎不会产生信号串扰。试剂经过严格的游离染料去除工艺，游离染料残留极低，非特异性背景吸附少，光稳定性，长时间激光扫描下信号衰减慢，是555nm波段开展糖链靶向研究的标杆级高亮度工具。

应用领域

AF555 ECL可用于细胞表面糖萼形态观察，依托其高亮度特性，与活细胞共孵育后通过荧光显微镜清晰呈现细胞膜上半乳糖基糖链的分布形态，直观展示细胞糖萼的完整结构。该试剂可应用于多色荧光共定位实验，在固定细胞或组织切片上与其他不同波段的抗体荧光标记同步使用，对比靶标糖链与特定蛋白的空间位置关系，为细胞黏附机制相关研究提供可靠标记工具。同时它也适用于糖链微阵列芯片检测，将凝集素滴加至固相化糖链阵列，依据AF555荧光信号强度判断不同糖链的结合亲和力，辅助完成糖生物学靶向筛选实验，为糖生物学相关非医疗方向研究提供稳定可靠的高亮度工具。

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