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技术文章

AF 546 ECL,AF546标记刺桐凝集素,连续长时间激光扫描下荧光信号衰减极慢

点击次数:8 发布时间:2026/11/12 9:20:24

产品介绍

AF546 ECL是将从刺桐(Erythrina Cristagalli)种子中天然提取纯化的刺桐凝集素,与Alexa Fluor 546荧光染料通过成熟的氨基定向偶联工艺制备而成的糖链特异性橙通道标记科研试剂。它完整保留了刺桐凝集素对Galβ1-4GlcNAc(N-乙酰乳糖胺)糖链结构的高亲和力识别特性,依托Alexa Fluor 546染料优化的多环共轭荧光骨架,实现了与主流实验室常规橙通道滤光片组的光谱适配,全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比,通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料,解决了传统橙通道凝集素光谱与仪器滤光片错位、信号采集效率偏低的痛点。试剂为橙红色至深红色冻干品,在中性生理缓冲液中溶解分散性,是橙通道开展N-乙酰乳糖胺靶向糖链研究的标杆级适配型工具。

基础参数

中文名称:AF546标记刺桐凝集素,AF546-刺桐凝集素

英文名称:AF 546 ECL,Alexa Fluor546-ECL,AF546-Erythrina Cristagalli Lectin

外观状态:橙红色至深红色冻干品

荧光光谱参数:最大激发波长约554 nm,发射波长约570 nm,完全适配常规橙通道滤光片采集区间

储存条件:-20℃避光密封干燥长期保存,避免反复冻融,复溶后建议分装为单次使用量,2–8℃避光短期可稳定存放,pH耐受范围6.5-8.5,常规生理缓冲液中荧光稳定性

用途:N-乙酰乳糖胺橙通道荧光标记,组织切片荧光成像,流式细胞术橙通道检测,常规糖链半定量分析

作用机理

AF546 ECL中的刺桐凝集素以天然活性二聚体形式存在,每个亚基的糖结合口袋通过的空间构象匹配,特异性识别并结合Galβ1-4GlcNAc糖链结构,对该类特征N-乙酰乳糖胺修饰具有高选择性。AF546荧光基团通过稳定的酰胺键锚定在ECL蛋白表面的赖氨酸残基上,标记位点远离蛋白核心糖结合口袋,偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在554nm波长激发下,偶联在蛋白上的AF546基团可发射出明亮的570nm橙红色荧光,该发射波段完全落在主流实验室常规橙通道滤光片的采集窗口内,无需调整仪器硬件即可实现高效的信号采集。

核心产品优势

AF546 ECL的核心差异化优势集中在橙通道的光谱适配综合表现上,相比传统橙通道标记的同类凝集素,AF546染料的激发与发射波长与主流实验室标配的橙通道滤光片组高度契合,信号采集效率显著提升,在同等标记浓度下可获得更高的信号背景比。试剂经过严格的游离染料去除工艺,游离染料残留低于3%,非特异性吸附极低,同时偶联比控制,批间差异极小,多次平行实验的结果一致性强,是橙通道开展N-乙酰乳糖胺靶向糖链研究的标杆级适配型工具。

应用领域

AF546 ECL可用于组织切片橙通道荧光成像,依托其的光谱适配特性,在常规荧光显微镜下直接观察组织切片中N-乙酰乳糖胺糖链的分布模式,无需额外调整滤光片配置即可获得清晰的橙通道成像信号。该试剂可应用于流式细胞术橙通道检测,作为橙通道探针标记细胞群体中靶标糖链高表达亚群,与蓝光、绿光、远红光通道探针联合使用构建多色检测体系。同时它也适用于糖链半定量比较,作为定量探针在固定化糖蛋白体系中完成不同样本间靶标糖链的相对含量半定量分析,孔间变异系数低,实验重复性,为糖生物学相关非医疗方向研究提供高适配性的稳定工具。

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原创作者:陕西新研博美生物科技有限公司

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