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技术文章

HRP PHA-E,辣根过氧化物酶标记菜豆凝集素E,避免过度显色导致背景升高

点击次数:5 发布时间:2026/11/10 9:28:56

产品介绍

HRP PHA-E是将从菜豆(Phaseolus vulgaris)种子中天然提取纯化的菜豆凝集素E,与辣根过氧化物酶(HRP)通过成熟的化学交联工艺制备而成的酶-凝集素偶联物。它完整保留了菜豆凝集素E对复杂型N-聚糖特征分支结构的高亲和力识别特性,同时依托HRP酶的催化信号放大能力,可通过催化多种显色底物生成稳定可检测的光信号,全程严格控制偶联反应的蛋白摩尔比,通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离组分,解决了普通凝集素直接标记信号弱、低丰度靶标难以检出的痛点。试剂为白色至类白色冻干粉末,在中性生理缓冲液中溶解分散性良好,是普通实验室无需荧光设备即可开展糖链检测的通用标杆级工具试剂。

基础参数

中文名称:辣根过氧化物酶标记菜豆凝集素E,HRP-外源凝集素(菜豆)

英文名称:HRP PHA-E,HRP-PHA-E,HRP-Phaseolus vulgaris lectin E

外观状态:白色至类白色冻干粉末

光谱特征:HRP组分在403 nm处有特征吸收峰,PHA-E组分在280 nm处有典型蛋白吸收峰

储存条件:-20℃避光密封干燥长期保存,避免反复冻融;复溶后建议分装为单次使用量,2–8℃避光短期可稳定存放,操作过程严禁使用含的缓冲液,防止HRP酶活性被不可逆抑制

用途:复杂型N-聚糖酶促显色标记,普通组织化学显色染色,ELISA比色定量分析

作用机理

HRP PHA-E中的菜豆凝集素E蛋白以天然活性四聚体形式存在,每个亚基都保留完整的糖结合口袋,可特异性识别并结合样本中复杂型N-聚糖的特征分支糖链结构,对该类特征糖基化修饰具有高选择性。HRP酶分子通过双功能交联剂与PHA-E表面氨基形成稳定共价连接,标记位点远离蛋白核心糖结合口袋与HRP酶活性中心,偶联过程完全不影响凝集素的糖链识别活性与酶的催化活性。在过氧化氢存在的条件下,HRP可催化DAB、TMB、AEC等多种底物发生显色反应,将凝集素的微量糖链识别事件转化为可放大的稳定显色信号,大幅提升低丰度靶标的检测灵敏度。

核心产品优势

HRP PHA-E的核心差异化优势集中在无需荧光设备的通用显色放大综合表现上,相比直接荧光标记的同类凝集素,HRP的酶促催化反应可实现信号的级联放大,低丰度靶标也能获得清晰可辨的检测信号,无需共聚焦、荧光扫描仪等特殊设备,普通光学显微镜、酶标仪即可完成信号读取。试剂经过严格的未反应组分去除工艺,游离HRP与游离凝集素残留极低,非特异性背景极低,同时其适用的底物体系选择丰富,可根据不同实验场景灵活选择沉淀型或可溶性显色底物,是普通实验室开展复杂型N-聚糖检测的通用标杆级工具试剂。

应用领域

HRP PHA-E可用于组织化学显色染色,依托其酶促显色特性,在石蜡或冰冻组织切片上完成靶标糖链的标记,通过DAB显色获得稳定的棕色阳性信号,配合普通光学显微镜即可观察糖链在组织内的分布模式。该试剂可应用于凝集素ELISA比色定量,作为包被或检测探针在96孔板体系中定量检测样本中靶标糖链的含量,通过TMB显色在450nm波长下读取数值,获得准确的定量结果。同时它也适用于糖蛋白印迹显色检测,在凝集素印迹实验中标记转印到膜上的靶标糖蛋白,通过增强化学发光或底物显色获得清晰条带,为糖生物学相关非医疗方向研究提供无需特殊设备的通用可靠工具。

文章配图-1

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原创作者:陕西新研博美生物科技有限公司

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