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技术文章

Cy5 PHA-E,Cy5标记菜豆凝集素E,用于共聚焦显微镜下细胞与组织样本

点击次数:11 发布时间:2026/11/9 9:22:18

产品介绍

Cy5 PHA-E是将从菜豆(Phaseolus vulgaris)种子中天然提取纯化的菜豆凝集素E,与Cy5花菁荧光染料通过成熟的NHS酯共价偶联工艺制备而成的糖链特异性远红通道标记科研试剂。它完整保留了菜豆凝集素E对β-1,6-分支N-连接寡糖结构的高亲和力识别特性,依托Cy5染料成熟的远红荧光性能,兼具高摩尔消光系数与良好组织穿透能力,全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比,通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料,解决了传统可见光区标记凝集素在生物样本中自发荧光干扰大、低丰度靶标检测灵敏度不足的痛点。试剂为深蓝色至蓝紫色冻干粉,在中性生理缓冲液中溶解分散性良好,是远红通道开展菜豆凝集素靶向糖链研究的经典普及型标杆工具。

基础参数

中文名称:Cy5标记菜豆凝集素E,Cy5-外源凝集素(菜豆)

英文名称:Cy5 PHA-E,Cy5-PHA-E,Cyanine5-Phaseolus vulgaris lectin E

外观状态:深蓝色至蓝紫色冻干粉

荧光光谱参数:最大激发波长约649 nm,发射波长约671 nm,适配常规633 nm/640 nm激光线

储存条件:-20℃避光密封干燥长期保存,避免反复冻融;复溶后建议分装为单次使用量,4℃避光短期可稳定存放数天,操作全程严格避光,防止光照导致荧光猝灭

用途:β-1,6-分支N-连接寡糖远红通道荧光标记,流式细胞术多色检测,远红荧光成像低背景观察

作用机理

Cy5 PHA-E中的菜豆凝集素E蛋白以天然活性四聚体形式存在,每个亚基都保留完整的糖结合口袋,可特异性识别并结合样本中带有β-1,6-分支结构的N-连接寡糖链,对该类特征糖基化修饰具有高选择性。Cy5荧光基团通过酰胺键锚定在PHA-E亚基表面,标记位点远离蛋白核心糖结合口袋,偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在649nm波长激发下,偶联在蛋白上的Cy5基团可发射出明亮的671nm远红荧光,该波段处于生物样本自发荧光极低的光学窗口,几乎不受样本内源性背景信号干扰,直接将凝集素的糖链识别事件转化为高信噪比的远红特征荧光信号。

核心产品优势

Cy5 PHA-E的核心差异化优势集中在远红通道的经典高灵敏综合表现上,相比传统可见光区标记的同类凝集素,Cy5染料的发射波长进入远红低自发荧光窗口,生物样本内源性背景噪声大幅降低,检测灵敏度显著提升,同时长波长光子在生物组织中的穿透深度明显增加,可实现普通薄组织样本的深层清晰成像。试剂经过严格的游离染料去除工艺,游离染料残留低于2%,非特异性吸附极低,同时其光谱轮廓锐利,与常规绿色、橙红荧光探针的光谱重叠度低,多色成像时通道串扰小,是远红通道开展β-1,6-分支N-连接寡糖研究的经典普及型标杆工具。

应用领域

Cy5 PHA-E可用于流式细胞术分析,依托其远红低背景特性,在流式细胞仪上标记细胞群体中靶标糖链高表达的亚群,配合其他荧光探针实现多参数同步检测。该试剂可应用于免疫荧光共定位成像,与绿光、橙光标记的抗体或探针联合使用,在荧光显微镜下观察靶标糖链与其他生物分子的亚细胞共定位关系。同时它也适用于凝集素亲和分析,作为远红区检测探针在96孔板或微流控芯片体系中定量检测不同样本中β-1,6-分支N-连接寡糖的含量,为糖生物学相关非医疗方向研究提供稳定可靠的经典工具。

文章配图-1

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原创作者:陕西新研博美生物科技有限公司

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