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技术文章
Cy5.5 PHA-E,Cy5.5标记菜豆凝集素E,可应用于多色荧光分析
点击次数:10 发布时间:2026/11/9 9:13:32
产品介绍
Cy5.5 PHA-E是将从菜豆(Phaseolus vulgaris)种子中天然提取纯化的菜豆凝集素E,与Cy5.5花菁荧光染料通过成熟的NHS酯共价偶联工艺制备而成的糖链特异性近红外一区标记科研试剂。它完整保留了菜豆凝集素E对复杂型N-聚糖中β1-6分支结构的高亲和力识别特性,依托Cy5.5染料优化的近红外荧光骨架,兼具高量子产率与的深层组织穿透能力,全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比,通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料,解决了传统可见光区标记凝集素在厚组织样本中背景偏高、成像深度受限的痛点。试剂为蓝紫色至近黑色冻干粉,在中性生理缓冲液中溶解分散性良好,是近红外一区开展菜豆凝集素靶向糖链深层组织成像研究的标杆级专用工具。
基础参数
中文名称:Cy5.5标记菜豆凝集素E,Cy5.5-外源凝集素(菜豆)
英文名称:Cy5.5 PHA-E,Cy5.5-PHA-E,Cyanine5.5-Phaseolus vulgaris lectin E
外观状态:蓝紫色至近黑色冻干粉
荧光光谱参数:最大激发波长约673 nm,发射波长约707 nm,属于近红外一区低自发荧光窗口
储存条件:-20℃避光密封干燥长期保存,避免反复冻融;复溶后建议分装为单次使用量,4℃避光短期可稳定存放,操作全程严格避光,防止光照导致荧光猝灭
用途:复杂型N-聚糖β1-6分支结构近红外一区荧光标记,厚组织样本深层成像,近红外多色检测体系搭建
作用机理
Cy5.5 PHA-E中的菜豆凝集素E蛋白以天然活性四聚体形式存在,每个亚基都保留完整的糖结合口袋,可特异性识别并结合样本中带有β1-6分支结构的复杂型N-聚糖,对该类特征糖基化修饰具有高选择性。Cy5.5荧光基团通过酰胺键锚定在PHA-E亚基表面,标记位点远离蛋白核心糖结合口袋,偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在673nm波长激发下,偶联在蛋白上的Cy5.5基团可发射出明亮的707nm近红外荧光,该波段处于生物样本自发荧光极低的近红外一区光学窗口,光在生物组织中的散射损耗大幅降低,直接将凝集素的糖链识别事件转化为高信噪比的深层成像荧光信号。
应用领域
Cy5.5 PHA-E可用于厚组织切片三维成像,依托其近红外低背景特性,在近红外共聚焦显微镜下对完整组织块进行逐层扫描,获得靶标糖链在组织内部的三维空间分布信息。该试剂可应用于多色荧光分析,作为近红外第四通道探针与其他可见光区探针联合使用,构建四色及以上的多色检测体系,在同一视野中同时观察多个不同靶标的分布。同时它也适用于糖生物学机制研究,作为特异性标记工具追踪特定糖基化修饰在细胞分化、组织发育过程中的动态变化,为糖生物学相关非医疗方向研究提供稳定可靠的标杆级工具。

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