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技术文章

CF488A PHA-E,CF488A标记菜豆凝集素E,无需调整光路参数即可直接上机使用

点击次数:11 发布时间:2026/11/6 9:20:27

产品介绍

CF488A PHA-E是将从菜豆(Phaseolus vulgaris)种子中天然提取纯化的菜豆凝集素E,与CF488A荧光染料通过成熟的NHS酯共价偶联工艺制备而成的糖链特异性绿光区标记科研试剂。它完整保留了菜豆凝集素E对复杂型N-聚糖中三甘露糖核心及外链半乳糖、N-乙酰氨基葡萄糖残基的识别能力,同时依托CF488A染料接近Alexa Fluor 488的光谱特性,兼具高量子产率与良好光稳定性,全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比,通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料,解决了传统FITC标记PHA-E光稳定性差、易淬灭的痛点。试剂为亮黄绿色至黄绿色冻干粉,在中性生理缓冲液中溶解分散性良好,是绿光通道开展菜豆凝集素靶向糖链研究的高普及通用标杆工具。

基础参数

中文名称:CF488A标记菜豆凝集素E,CF488A-外源凝集素(菜豆)

英文名称:CF488A PHA-E,CF488A-PHA-E,CF488A-Phaseolus vulgaris lectin E

外观状态:亮黄绿色至黄绿色冻干粉

荧光光谱参数:最大激发波长约490–495 nm,发射波长约515–519 nm,与常规FITC通道完全兼容

储存条件:-20℃避光干燥密封保存,避免反复冻融;复溶后可溶于水、PBS及常规中性缓冲液,工作液建议现配现用,操作全程避光,防止荧光染料发生不可逆光漂白

用途:复杂型N-聚糖绿光区荧光标记,细胞表面糖链图谱分析,固定样本荧光显微观察

作用机理

CF488A PHA-E中的菜豆凝集素E蛋白以天然活性四聚体形式存在,每个亚基都保留完整的糖结合口袋,可特异性识别并结合样本中复杂型N-聚糖的三甘露糖核心及外链半乳糖、N-乙酰氨基葡萄糖残基,对该类特征糖基化修饰具有高选择性。CF488A荧光基团通过NHS活性酯与PHA-E表面赖氨酸残基的ε-氨基反应形成稳定酰胺键,标记位点远离蛋白核心糖结合口袋,偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在488nm波长激发下,偶联在蛋白上的CF488A基团可发射出明亮的绿色荧光,该波段完全适配所有常规实验室标配的FITC滤光片组,无需额外更换成像设备,一步孵育即可完成靶标糖链的原位标记。

核心产品优势

CF488A PHA-E的核心差异化优势集中在绿光通道的高稳定低背景综合表现上,相比传统FITC标记的PHA-E,CF488A染料的光稳定性大幅提升,长时间光照下荧光淬灭速率显著降低,在宽pH环境下也能维持稳定的荧光性能。试剂经过严格的游离染料去除工艺,游离染料残留低于2%,非特异性吸附极低,同时其光谱轮廓锐利,与相邻红色荧光通道的信号重叠度远低于传统FITC,多色成像时通道串扰明显降低,是绿光通道开展复杂型N-聚糖研究的高普及通用标杆工具。

应用领域

CF488A PHA-E可用于细胞标记与糖链分布分析,将试剂与活细胞或固定细胞孵育,特异性标记样本中含复杂型N-聚糖的区域,配合荧光显微镜完成细胞表面糖链图谱的可视化观察。该试剂可应用于凝集素组织化学染色,在固定组织切片上进行荧光标记,直观呈现特定糖基化修饰在组织内部的空间分布模式。同时它也适用于多色共染实验,作为绿光通道探针与DAPI、红色通道凝集素探针联合使用,实现不同糖链与细胞结构的同视野对比观察,为糖生物学相关非医疗方向研究提供稳定可靠的通用工具。

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原创作者:陕西新研博美生物科技有限公司

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