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技术文章

AF 546 PHA-E,AF546标记菜豆凝集素E,直接用于共聚焦显微镜下细胞与组织切片

点击次数:5 发布时间:2026/11/4 9:25:02

产品介绍

AF 546 PHA-E是将从菜豆(Phaseolus vulgaris)种子中天然提取纯化的菜豆凝集素E,与Alexa Fluor 546荧光染料通过成熟的NHS酯共价偶联工艺制备而成的糖链特异性橙红区标记科研试剂。它完整保留了菜豆凝集素E对β-1,6-分支N-连接寡糖结构的高亲和力识别特性,对该类特殊糖链修饰具有的选择性,同时依托Alexa Fluor 546染料经过大量科研验证的经典光谱特性,兼具高亮度与极低的多色通道串扰表现,全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比,通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料,解决了传统TRITC标记PHA-E光谱拖尾严重、多色成像通道串扰大的痛点。试剂为深红色至紫红色冻干粉,在中性生理缓冲液中溶解分散性良好,是橙红区开展菜豆凝集素靶向糖链多色成像研究的经典标杆工具。

基础参数

中文名称:AF546标记菜豆凝集素E,AF546-外源凝集素(菜豆)

英文名称:AF 546 PHA-E,Alexa Fluor546-PHA-E,Alexa Fluor546-Phaseolus vulgaris lectin E

外观状态:深红色至紫红色冻干粉

荧光光谱参数:最大激发波长约546 nm,发射波长约573 nm,荧光量子产率约0.79(PBS, pH 7.4, 25℃)

储存条件:-20℃避光密封干燥保存,避免反复冻融,复溶后建议2-8℃避光短期储存

用途:β-1,6-分支N-连接寡糖橙红区荧光标记,多色成像低串扰通道搭建,常规荧光显微与流式分析

作用机理

AF 546 PHA-E中的菜豆凝集素E蛋白以天然活性四聚体形式存在,每个亚基都保留完整的糖结合口袋,可特异性识别并结合样本中带有β-1,6-分支结构的N-连接寡糖链,对该类特征糖基化修饰具有高选择性。Alexa Fluor 546荧光基团通过NHS活性酯与PHA-E蛋白表面赖氨酸残基的氨基反应形成稳定酰胺键,标记位点远离蛋白核心糖结合口袋,偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在546nm波长激发下,偶联在蛋白上的Alexa Fluor 546基团可发射出明亮的573nm橙红色荧光,该波段完美适配所有常规实验室标配的TRITC滤光片组,且光谱轮廓锐利,长波拖尾极少,直接将凝集素的糖链识别事件转化为低串扰的特征荧光信号,无需复杂的光谱拆分操作,一步孵育即可完成靶标糖链的原位标记。由陕西 新.研.博.美 生物科技小编木木整理

核心产品优势

AF 546 PHA-E的核心差异化优势集中在橙红区的经典低串扰综合表现上,相比传统TRITC标记的PHA-E,Alexa Fluor 546染料的光谱分布更窄,长波方向无明显拖尾,与FITC、Cy5等相邻通道的信号重叠度远低于TRITC,多色成像时通道串扰大幅降低,无需复杂的光谱补偿即可获得清晰的多通道成像结果。试剂经过严格的游离染料去除工艺,游离染料残留低于1%,非特异性吸附极低,同时其光稳定性显著优于传统罗丹明类染料,长时间连续成像下信号衰减速率慢,完全支持常规共聚焦显微镜的多通道层扫成像,是橙红区开展β-1,6-分支N-连接寡糖多色成像研究的经典标杆工具。

文章配图-1

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原创作者:陕西新研博美生物科技有限公司

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