产品介绍

AF 430 PHA-E是将从菜豆（Phaseolus vulgaris）种子中天然提取纯化的菜豆凝集素E，与Alexa Fluor 430荧光染料通过成熟的共价偶联工艺制备而成的糖链特异性蓝绿过渡区标记科研试剂。它完整保留了菜豆凝集素E对β-1,6-分支N-连接寡糖结构的高亲和力识别特性，对该类特殊糖链修饰具有的选择性，同时依托Alexa Fluor 430染料优化的荧光骨架，兼具高光量子产率与极低样本自发荧光干扰的特点，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料，解决了传统蓝绿过渡区标记凝集素量子产率低、背景信号偏高的痛点。试剂为淡黄色至棕黄色冻干粉，在中性生理缓冲液中溶解分散性良好，是蓝绿过渡区开展菜豆凝集素靶向糖链研究的特色专用工具。

基础参数

中文名称：AF430标记菜豆凝集素E，AF430-外源凝集素(菜豆)

英文名称：AF 430 PHA-E，Alexa Fluor430-PHA-E，Alexa Fluor430-Phaseolus vulgaris lectin E

外观状态：淡黄色至棕黄色冻干粉

荧光光谱参数：最大激发波长约432 nm，发射波长约445 nm，荧光量子产率约0.32（PBS, pH 7.4, 25℃）

储存条件：-20℃避光密封干燥保存，避免反复冻融，复溶后建议4℃避光短期储存，2-4周内使用完毕，操作过程中全程严格避光，避免接触含SDS、强酸强碱的极端缓冲液，防止荧光染料共轭体系发生不可逆破坏

用途：β-1,6-分支N-连接寡糖蓝绿过渡区荧光标记，低自发荧光样本成像，凝集素亲和分析

作用机理

AF 430 PHA-E中的菜豆凝集素E蛋白以天然活性四聚体形式存在，每个亚基都保留完整的糖结合口袋，可特异性识别并结合样本中带有β-1,6-分支结构的N-连接寡糖链，对该类特征糖基化修饰具有高选择性。Alexa Fluor 430荧光基团通过NHS活性酯或马来酰亚胺衍生物，与PHA-E蛋白表面的赖氨酸残基氨基或半胱氨酸残基巯基反应形成稳定共价键，标记位点远离蛋白核心糖结合口袋，偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在432nm波长激发下，偶联在蛋白上的Alexa Fluor 430基团可发射出明亮的445nm蓝绿色荧光，该波段处于生物样本自发荧光极低的蓝绿过渡区，几乎没有内源性物质的背景信号干扰，直接将凝集素的糖链识别事件转化为高信噪比的特征荧光信号，无需复杂的背景扣除操作，一步孵育即可完成靶标糖链的原位标记。由陕西 新.研.博.美 生物科技小编木木整理

应用领域

AF 430 PHA-E可用于活细胞膜糖链长时间连续观察，依托其的抗光漂白性能，在荧光显微镜下对活细胞样本进行长时间连续成像，追踪细胞膜表面靶标糖链的动态分布变化。该试剂可应用于凝集素亲和分析，作为荧光标记探针用于糖链微阵列的标记与检测，实现大量不同糖链结构的平行分析。同时它也适用于仿生材料表面糖基化程度评估，通过荧光信号强度定量表征糖基化水凝胶、仿生修饰表面的功能化程度，为糖生物学相关非医疗方向研究提供稳定可靠的特色工具。

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