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技术文章
AF 350 PHA-E,AF350标记菜豆凝集素E,实现四种不同糖链靶标的同步定位观察
点击次数:10 发布时间:2026/11/3 9:39:04
产品介绍
AF 350 PHA-E是将从菜豆(Phaseolus vulgaris)种子中天然提取纯化的PHA-E凝集素,与Alexa Fluor 350荧光染料通过成熟的共价偶联工艺制备而成的糖链特异性紫外蓝区标记科研试剂。它完整保留了PHA-E凝集素对带有平分型N-乙酰葡糖胺修饰的复杂型N-糖链的高亲和力识别特性,对该类特殊糖链结构具有的选择性,同时依托Alexa Fluor 350染料优化的光学骨架,兼具高水溶性与的抗光漂白性能,全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比,通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料,解决了传统同波段早期标记凝集素水溶性差、易发生非特异性聚集的痛点。试剂为白色至淡蓝色冻干粉,在中性生理缓冲液中溶解分散性良好,是紫外蓝区下复杂型N-糖链示踪的经典标杆工具。
基础参数
中文名称:AF350标记菜豆凝集素E,AF350-菜豆凝集素E
英文名称:AF 350 PHA-E,Alexa Fluor350-PHA-E,Alexa Fluor350-Phaseolus vulgaris lectin E
外观状态:白色至淡蓝色冻干粉
荧光光谱参数:最大激发波长约346 nm,发射波长约442 nm
储存条件:-20℃避光密封干燥保存,避免反复冻融,复溶后建议4℃避光短期储存,2周内使用完毕,操作过程中全程严格避光,避免接触强氧化环境,防止荧光染料发生不可逆光漂白降解
用途:平分型N-乙酰葡糖胺修饰复杂型N-糖链紫外蓝区荧光标记,多色成像蓝通道构建,基础糖链分布示踪
作用机理
AF 350 PHA-E中的菜豆凝集素E蛋白以天然活性四聚体形式存在,每个亚基都保留完整的糖结合口袋,可特异性识别并结合样本中带有平分型N-乙酰葡糖胺分支的复杂型N-糖链结构,对该类特殊糖链修饰具有高选择性。AF350荧光基团通过稳定的共价键与PHA-E蛋白表面赖氨酸残基的氨基相连,标记位点远离蛋白核心糖结合口袋,偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在350nm波长紫外光激发下,偶联在蛋白上的AF350基团可发射出明亮的442nm蓝色荧光,该波段处于紫外蓝区低串扰窗口,可与FITC、Cy3、Cy5等多个不同波段的荧光探针完美组合,直接将凝集素的糖链识别信号转化为特征蓝色荧光信号,无需复杂二次标记操作,一步孵育即可完成靶标糖链的原位标记。
核心产品优势
AF 350 PHA-E的核心差异化优势集中在紫外蓝区的高稳定表现上,相比传统同波段的AMC、DAPI类标记凝集素,Alexa Fluor 350染料的水溶性大幅提升,在生理缓冲液中几乎完全不会发生染料聚集,非特异性吸附远低于传统紫外区标记凝集素。试剂经过严格的游离染料去除工艺,游离染料残留低于2%,相同工作浓度下背景信号极低,同时其光稳定性经过大量科研文献验证,长时间紫外光照射下信号衰减速率远低于传统紫外区荧光染料,是紫外蓝区开展复杂型N-糖链研究的经典标杆工具。
应用领域
AF 350 PHA-E可用于多色荧光成像体系的蓝通道搭建,依托其低串扰的蓝区发射特性,与FITC、Cy3等可见光通道探针联合使用,搭建低信号重叠的三色及以上多色标记体系,实现多个不同靶标糖链的同时示踪。该试剂可应用于细胞内糖链的亚细胞分布观察,依托其的水溶性与低非特异性吸附特性,清晰显示细胞内带有平分型修饰的复杂型N-糖链的亚细胞定位模式。同时它也适用于基础糖生物学定性分析,作为蓝区标记探针快速定性检测不同样本中靶标糖链的存在情况,为糖生物学相关非医疗方向研究提供稳定可靠的经典工具。由陕西 新.研.博.美 生物科技小编木木整理

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原创作者:陕西新研博美生物科技有限公司






