产品介绍

AF350-NPL是将从水仙鳞茎中天然提取的Narcissus Pseudonarcissus凝集素（NPL），与Alexa Fluor350蓝色荧光染料通过酰胺键共价偶联制备而成的糖链特异性蓝色荧光标记科研试剂。它完整保留了水仙凝集素对高甘露糖型寡糖链、末端α-D-甘露糖残基的高亲和力识别特性，同时引入AF350染料的短波长荧光光学性能，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步纯化去除未结合的游离AF350染料，解决了传统蓝色荧光凝集素光稳定性差、背景信号高的痛点。试剂以稳定的淡蓝色至淡黄色冻干粉末形式提供，在中性生理缓冲液中溶解分散性良好，是糖生物学多色荧光成像体系中蓝光通道下高甘露糖糖链示踪的高可靠性特色工具。

基础参数

中文名称：Alexa Fluor350标记水仙凝集素，AF350-水仙凝集素

英文名称：AF 350 NPL，AF350-NPL，Alexa Fluor350-NPL，Alexa Fluor350-Narcissus Pseudonarcissus Lectin

外观状态：淡蓝色至淡黄色冻干粉末

荧光光谱参数：激发波长约346 nm，发射波长约442 nm

储存条件：-20℃以下避光密封干燥保存，避免反复冻融，复溶后4℃环境下可短期放置1周，操作过程中全程严格避光，避免长时间紫外光直射，防止AF350荧光染料发生光漂白降解

用途：高甘露糖糖链蓝色荧光标记，多色荧光成像蓝光通道糖示踪，固定细胞与组织切片糖基化表型分析

作用机理

AF350-NPL中的水仙凝集素蛋白以天然活性二聚体形式存在，每个亚基都保留完整的糖结合位点，可特异性识别并结合样本中含末端α-1,3或α-1,6连接甘露糖残基的高甘露糖型寡糖链，对高甘露糖结构的亲和力远高于普通单甘露糖分子。共价偶联在蛋白表面赖氨酸残基上的AF350荧光基团，在350nm左右紫外光激发下可发射出明亮的442nm蓝色荧光，该波段与常规DAPI核染的光谱特性高度适配但又存在明确区分度，可直接将凝集素的糖链识别信号转化为独立的蓝色荧光信号，无需二次孵育等复杂操作，一步孵育即可完成靶标高甘露糖糖链的原位标记，整个过程不会破坏凝集素的天然糖结合活性，也不会对样本的基础细胞结构造成明显影响。

应用领域

AF350-NPL可用于高甘露糖糖链蓝色荧光标记，对固定细胞或组织切片进行一步孵育标记，清晰呈现样本中高甘露糖型糖蛋白的空间分布模式，信号清晰辨识度高。该试剂可应用于多色荧光成像蓝光通道糖示踪，与FITC、Cy3、Cy5等不同波段的荧光探针搭配使用，在多色成像面板中占据独立的蓝光通道，实现不同靶标蛋白与高甘露糖糖链的同步共定位分析，通道之间几乎无光谱串扰。同时它也适用于固定细胞与组织切片糖基化表型分析，依托其对高甘露糖糖链的高特异性识别能力，快速对比不同处理组样本间高甘露糖糖基化的表达差异，为糖生物学多维度联合成像研究提供稳定可靠的特色工具。

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