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技术文章
elisa样本的采集和保存要注意那些问题
点击次数：1901 发布时间：2025/6/27 10:11:39
elisa样本的采集和保存要注意那些问题
以下是ELISA实验中样本采集与保存的关键注意事项，综合来源整理：
一、血液样本(血清/血浆)
采集要求
抗凝剂选择：血浆需使用EDTA/肝素钠抗凝管，避免使用肝素抗凝剂(可能导致假阳性)
避免溶血：红细胞裂解释放的过氧化物酶会干扰HRP系统检测
离心参数：
血清：室温静置1-2小时后，4℃ 1000×g离心20分钟
血浆：采血后30分钟内4℃ 1000×g离心15分钟
保存条件
短期(≤5天)：2-8℃保存，避免IgG聚合导致本底加深
长期：分装后-20℃或-80℃冻存，反复冻融≤3次
二、细胞/组织样本
细胞培养上清
收集后立即4℃ 1000×g离心20分钟去除碎片
分装冻存避免反复冻融(导致蛋白降解)
组织匀浆
预处理：PBS冲洗后按1:9(重量:体积)比例匀浆，冰浴操作
离心：4℃ 5000×g离心5-10分钟取上清
三、其他液体样本
尿液
优先采集晨尿(浓缩度高，干扰物少)
2-8℃保存≤48小时，长期需-20℃冻存
脑脊液
无菌采集后4℃ 2500×g离心10分钟
-70℃可保存6个月
四、通用注意事项
分装原则
按单次用量分装，避免反复冻融(如：100μl/管)
污染控制
细菌污染会引入内源性HRP，导致假阳性
使用无菌耗材，操作全程低温(冰浴)
标记规范
清晰标注样本类型、采集时间、冻存次数
五、特殊处理建议
高脂血样本：需超速离心(10000×g)去除脂蛋白干扰
冻融后处理：融化后轻柔混匀(避免涡旋)，4℃ 1500×g离心去除沉淀
以上操作需结合具体试剂盒要求调整。样本处理不当可使检测误差增加30%以上。
注：以上资料仅供参考，建议实验时设置复孔并同步制作标准曲线。具体操作细节可能因品牌差异需参考对应说明。
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