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技术文章

Annexin V-FITC/AF647

点击次数:4232 发布时间:2021/3/5 9:58:42

细胞凋亡检测试剂盒

产品优势
①检测效果好:特异性强、灵敏度高,对细胞凋亡的结果进行检测,阴阳性分群效果明显。
②操作简便快捷:只需分别加入缓冲液、荧光标记物Annexin V和核染色液PI即可;且染色仅需15-20分钟。
③检测方法多样:可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。
④质量保证:原材料自主研发,严格质量控制,无忧售后。

试剂盒简介
Annexin V细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V Apoptosis Detection Kit)是用荧光素FITC/AF647标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷脂酰丝氨酸的种细胞凋亡检测试剂盒。还提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液,碘化丙啶可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞,呈现红色荧光。对于坏死细胞,由于细胞膜的完整性已经丧失,Annexin V-FITC/Annexin V-AF647可以进入到细胞浆内,与位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸结合,从而也使坏死细胞呈现绿色/红色荧光。

BA00101试剂盒检测结果

Annexin V-FITC试剂盒的流式检测效果参考图1,荧光显微镜检测效果参考图2




图1

图1.细胞用本试剂盒染色后流式细胞仪检测效果验证图。Jurkat细胞用10μM喜树碱(Camptothecin)作用4小时后,未经染色(A)、仅用本试剂盒中的PI进行染色(B)、仅用本试剂盒中的Annexin V-FITC进行染色(C)、用本试剂盒中的Annexin V-FITC和PI进行双染(D)。从图中可以看出,未经染色的是双阴性细胞(A),仅PI染色后出现了预期的PI染色阳性的细胞,仅Annexin V-FITC染色出现了预期的Annexin V-FITC染色阳性的细胞,Annexin V-FITC和PI双染出现了预期的仅Annexin V-FITC染色阳性的凋亡细胞和双阳性的坏死细胞。实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

图2

图2. Annexin V-FITC和碘化丙啶(PI)染色效果图。图中绿色荧光为Annexin V-FITC染色细胞(图a),红色荧光为碘化丙啶染色细胞(图b)。仅被绿色荧光染色的为凋亡细胞,被绿色和红色荧光双染的是坏死细胞(图c),未被荧光染色的为正常细胞。


Annexin V检测原理
Annexin V是种分子量为35-36kD的Ca²+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,简称PS)高亲和力特异性结合。在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。用带有绿色荧光的荧光探针FITC标记的Annexin V,即Annexin V-FITC,就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷脂酰丝氨酸的外翻这细胞凋亡的重要特征。此方法被公认为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之。

原创作者:上海雅吉生物科技有限公司

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