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技术文章

氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量测定样本处理及要求

点击次数:3214 发布时间:2021/7/7 16:46:28

氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量测定样本处理及要求:

1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
BrainHeartInfusionAgar500g原装BD 241820
(脑心浸液琼脂)
BrainInfusionPower1kg国产
(脑浸粉)
Brij-35200g/5kg原装Sigma P1254
(布里杰-35)
Brilliantgreen10g/25g/50g/100g原装Amresco0502
(亮绿)
BrilliantGreenagar500g原装BD 228530
(亮绿琼脂)
BromcresolBlue,Na5g/25gAmresco分装
(溴酚兰)
BromcresolGreen5g/25g/50g/500g原装Amresco 0816
(溴甲酚绿)
BromothymolBlueNa5g/25g/50g原装Amresco 0554
(溴麝香草酚兰
(溴百里酚兰钠))
BSA,FractionV5g/25g/100gSigma分装
(牛血清白蛋白)
CalciumChloride2H2O100g/500g/5kg原装Sigma C3881
(氯化钙)
CalciumIonophoreIII1mg原装/5mg原装Sigma C7522
(钙离子载体)
CalfThymusDNA50mg/100mg/500mgSigma D1501
(小牛胸腺DNA)

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