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技术文章
谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）操作步骤
点击次数：3487 发布时间：2021/7/7 16:49:49
谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）操作步骤：
1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
CalciumChloride2H2O100g/500g/5kg原装Sigma C3881
（氯化钙）
CalciumIonophoreIII1mg原装/5mg原装Sigma C7522
（钙离子载体）
CalfThymusDNA50mg/100mg/500mgSigma D1501
（小牛胸腺DNA）
CAPS25g/100g/250g/1kg原装Amresco 0365
（3-
（环已胺）-1-丙磺酸）
CAPSO25g/100g/1kg原装Amresco J623
（3-
（环已胺）-1-丙磺酸）
CarbenicillinNa21g/5g/10g/25g原装INALCO1758-9317
（羧苄青霉素钠）
CarbenicillinNa210g/100g国产
（羧苄青霉素钠）
Casaminoacids500g原装/2kg原装BD 223020
（酸水解酪素）
Casaminoacids,Vitaminassay100g原装BD 228820
（维生素分析酪蛋白水解物）
Casein25g/100g/250g/1kgSigma C5890
（酪蛋白）
CaseinacidsHydrolysate100g/250g/1kg/5kg原装Sigma A2427
（酸水解酪素）
CaseinEnzymaticHydrolysate100g/250g/1kg/5kg原装Sigma C0626
（酶水解酪素）
原创作者：上海谷研实业有限公司
