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技术文章
分享： ELISA试验过程中各种样本不同的处理办法
点击次数：3846 发布时间：2019/5/29 16:29:08
ELISA试验过程中各种样本不同的处理办法
在搜集样本前都必须有一个完好的方案，必须清楚要检测的成份是否满足稳定。对搜集后当天就进行检测的样本，及时储存在4℃备用。关于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，zui好-70℃冻存备用。标本应防止重复冻融。 液体类标本: 包含血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培育上清等。
1. 血清：室温血液天然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清，保存 过程中如出现沉积，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求挑选EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟 左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管搜集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清，保存过程中如有沉积 构成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4. 培育细胞：检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左 右。通过重复冻融或参加安排蛋白萃取试剂，以使细胞损坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清。保存过程中如有沉积构成，应再次离心。
5. 细胞培育上清：检测分泌性的成份时，用无菌管搜集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心 搜集上清。
6. 安排标本：切开标本后，称取分量。参加一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融 化后仍然保持2-8℃的温度。参加一定量的PBS（PH7.4），或安排蛋白萃取试剂，用手艺或匀浆器 将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清。分装后一份待检测，其他冷 冻备用。
6. 安排标本：切开标本后，称取分量。参加一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融 化后仍然保持2-8℃的温度。参加一定量的PBS（PH7.4），或安排蛋白萃取试剂，用手艺或匀浆器 将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清。分装后一份待检测，其他冷 冻备用。
7. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行试验。若不能马上进
行试验，可将标本放于-20℃保存，但应防止重复冻融.
8. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3按捺辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
原创作者：上海谷研实业有限公司
