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技术文章
探讨蛋白对白血病细胞分化的影响
点击次数：3854 发布时间：2018/9/18 9:54:19
探讨microRNA-10b(miR-10b)通过调节锌指蛋白Krüppel-like factor 4(KLF4)的表达对急性白血病细胞分化的影响。Real-time PCR及Western blot分别检测不同分化程度的白血病细胞系中miR-10b与KLF4的表达; 1,25-二羟基维生素D3(1,25D3)诱导人白血病细胞系HL60向单核系分化, 检测此过程中miR-10b及KLF4的表达变化; 利用体外合成的寡核苷酸(miR-10b mimics)转染HL60细胞, 瑞氏–吉姆萨染色观察1,25D3诱导后细胞分化形态学的改变; 流式细胞术检测单核细胞表面标志CD14的表达。
结果显示, miR-10b在分化早期的KG-1a细胞中表达最高, 在分化晚期的U937、 THP-1细胞中表达最低(P<0.01), 而KLF4的表达与之相反; 1,25D3诱导HL60向单核系分化过程中, miR-10b表达呈时间依赖性降低, KLF4表达则逐渐增高; HL60细胞中过表达miR-10b后可抑制 1,25D3诱导的细胞分化形态特征的改变及CD14的表达(P<0.05)。提示miR-10b通过负调控KLF4的表达阻滞白血病细胞HL60单核系的分化。
急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML) 是起源于造血干细胞的恶性克隆性疾病, 其一个主要特征是骨髓造血细胞分化成熟障碍。正常造血细胞的分化及白血病细胞分化阻滞受多因素的调节, microRNA(miRNA)调控作为主要的表观遗传学机制之一, 在此过程中发挥了重要的作用。miRNA 是一类长约19-25 bp的单链非编码小RNA, 主要在转录后水平调控靶基因的表达, 参与多种生物学过程的调节, 如细胞的分化、增殖、凋亡等。
原创作者：上海谷研实业有限公司
