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技术文章

外周血单个核细胞分离

点击次数:4509 发布时间:2021/7/21 10:46:16

外周血单个核细胞分离

圣宾仪器科技上海有限公司

原理

PBMC(peripheral blood mononuclear cell),外周血单个核细胞,顾名思义,其主要细胞类型为血液里边具有单个核的细胞,主要包括淋巴细胞(T\B),单核细胞,吞噬细胞,树突状细胞和其他少量细胞类型。其中淋巴细胞占很大一部分。分离PBMC的主要目的是为了将多核细胞和红细胞去除,从而能够很方便地模拟体外的血液免疫环境。

人外周血单个核细胞分离的常用方法之一是葡聚糖-泛影葡胺密度梯度离心法。在试管中,将血液重叠与淋巴细胞分层液(密度1.077g/L)之上离心时,由于粒细胞(1.090g/L)、红细胞(1.092g/L)、淋巴细胞(1.070g/L)的密度不同而相互分开。从顶部到底部可分为四层:血浆、单核细胞、淋巴细胞、粒白细胞及红细胞。

注意事项

抽血后在4h内使用。

全过程在室温下进行。

加血于分离液上一定要轻缓,避免破坏界面。

若收集的单个核细胞用于淋巴细胞转化试验,则用1ml含5%胎牛血清的RPMI-1640保存细胞;若用于第二天的实验,则用含2ml5%胎牛血清的RPMI-1640保存细胞

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