菌类多糖提取_技术交流_技术文章_上海喆图科学仪器有限公司

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技术文章

菌类多糖提取

点击次数：3704 发布时间：2019/4/28 12:58:46

今天喆图小编来讲讲金针菇多糖提取所需试剂仪器设备：蒸馏水、纤维素酶、无水乙醇、、正丁醇、氯化钠、三氯一酸、氢氧化钠、鼓风干燥箱、浓缩装置、离心机、真空烘箱、冰箱、色谱柱、冷冻干燥机

操作过程：原料-预处理－－酶解－－浸提－－浓缩－－醇析－－脱蛋白－－干燥－－多糖纯品－－精制－－多糖精品
（1）原料：新鲜金针菇
（2）预处理：新鲜金针菇65°C放入鼓风干燥箱烘干6h制成干品，将金针菇子实体干品粉碎，粉碎粒度为3－－5mm，粉碎后装入容器中加入2倍质量的水，在90-95°C条件下加热处理10-15min，得到金针菇子实体匀浆
（3）酶解：向匀浆中加入0.15%的纤维素酶以破坏金针菇子实体的细胞壁，使多糖释放出，来，酶解温度40°C ,ph为4,5时间为3h
（4）浸提：向容器中加入20倍样品质量的水，在100°C，ph6.5的条件下浸提1h，过滤并收集滤液
（5）浓缩：将滤液在40°C压力0.2MPa条件下浓缩至原体积是我1/3
（6）醇析：向浓缩液中加入无水乙醇至乙醇含量为70%，可以看到有沉淀析出，静置一段时间至沉淀完全析出，在离心分离，收集沉淀，并于鼓风干燥箱中烘干得到多糖粗品
（7）纯化脱蛋白质：将多糖粗品按样品与氯方-正丁醇（氯方-正丁醇之比为1:0.2）之比为1:0.25复溶并进行充分震荡，可将游离蛋白变性成为不容性物质，经离心分离去除，此过程通常反复进行5-8次，每次震荡30min，才能很好的去除蛋白质，除蛋白后的多糖溶液进行真空干燥，即可得到纯多糖产品
（8）精制：粗多糖粉末溶于0.1mol/L的氢氧化钠溶液中，至于5-8°C低温培养箱冷置12h,离心弃去沉淀、滤液加入40%的三氯一酸使之达到8%的含量，再置于低温冰箱中5-8°C冷置12h离心，将沉淀加入0.1mol/L氯化钠溶液洗脱分离，用硫酸-苯酚跟踪检测，收集（收率约为45%）多糖组分的母液，再取母液以0.1mol/L的氢氧化钠溶液中和至ph6.5-7.0，然后将上述洗脱液适当浓缩，蒸馏透析后，在用色谱分离纯化。用0.1mol/L的氢氧化钠溶液洗脱。收集洗脱液的糖样

（9）精品 : 将此糖样经减压浓缩后，冷冻干燥得到的白色粉末状金针菇多糖精品。

以上内容仅供参考！

原创作者：上海喆图科学仪器有限公司

鼓风干燥箱

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