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技术文章
胚胎怎么养(二)
点击次数:3747 发布时间:2018/2/28 12:47:42
胚胎体外培养之所以重要,一是我们可以在体外对胚胎进行操作,比如基因诊断,转基因,克隆之类的;二是我们可以避免由于一些生育系统缺陷导致的不孕症。
上次我们说过,目前主流的做法是,微滴培养。具体做法就是用培养液做成微滴,微滴上覆石蜡油。然后将胚胎转移到微滴中,放入恒温恒湿通入一定配比气体的培养箱中培养。
所以,对于胚胎培养,直接与胚胎接触的培养液很关键也很重要。胚胎培养液提供了胚胎发育的微环境。而这个微环境还与培养箱中的温度,气体状态和湿度相关。培养液可以自制也可以买商品化的。自制的培养基要考虑培养效果,批次间的差异和安全性。而商品化的培养基在人和小鼠上比较成熟,可以买来现用。缺点就是比较贵,不知道其中成份,不适宜研究使用。如果是自制,就照着培养基配方买。这个胚胎培养液的配方在早期发表论文中都可以找到。贴一个配方我们来讨论一下。
上图给除了最原始的不同物种的胚胎培养液分配。我们可以知道,胚胎培养液配方因物种不同略有差异。至于为什么会有这种差异,主要来自实践中的经验。但是大的原则还是有的,无非就是和细胞培养、细菌培养的原则差不多,要有盐离子,要有能量物质,要有pH缓冲物质,要有营养物质等。要说明的是,胚胎培养始于上世纪五十年代,到现在培养液配方经过迭代,再加上各个实验室都有自己不同的优化配方,胚胎培养效果也得到了比较大的提升。但是科学是无止境的嘛,现在的科研还是临床,都对培养基配方不太满意的原因是,我们现在的培养体系还不够高效。
至于如何改善呢,一般有两个方式,一个是“Let the embryo choose”,一个是“Back to nature”。第一个方式很好理解,就是实验不同的配方,改变不同配方里的物质配比,看看胚胎在什么样的环境中长的好;第二个方式就要提升现有的分析化学水平,分析胚胎在体内的生存环境中(输卵管液)的物质种类,含量。然后我们去按照实际来配比就行了。但是这两种方法都比较路漫漫。科学的飞跃可没那么容易。
细胞培养的过程大概是这样的:失败—成功—体味—收获—思考—交流。然后升华。此前的相关技术最多能将受精卵在人工环境中培育4天,然后必须移植回子宫中,不然受精卵就会死亡。而诺丁汉大学研究人员开发出一种用分子聚合物制成的装置,它能够模拟子宫中柔软的组织。用实验鼠受精卵进行的实验显示,受精卵在这个“人造子宫”中可以培育到第8天。
这几天的差距在胚胎的发育中非常重要。在前4天,受精卵还只能发育到囊胚期,是一个由几十个细胞组成的小球;而在第4天至第8天,会出现一些器官发育的迹象。
在本次研究中,研究人员观察到有的细胞开始与主体分离,它们如果继续发育就会形成头部。领导研究的沙克谢夫教授说,这项成果使研究人员能够前所未有地观察胚胎发育。

原创作者:上海喆图科学仪器有限公司






