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技术文章
细胞P38激酶总活性光度法定量检测试剂盒样品非特异活性测定
点击次数:4006 发布时间:2021/6/24 18:07:40
一、细胞P38激酶总活性光度法定量检测试剂盒样品非特异活性测定
检测开始前,移取xx微升缓冲液(Reagent C)到1.5毫升离心管,分别加入xx微升专性液(Reagent H)和待测样品(注意:100微克细胞裂解蛋白),混匀后,放进30℃培养箱里孵育30分钟。然后继续下列操作。
1. 移取xx微升缓冲液(Reagent C)到新的比色皿
2. 加入xx微升酶促液(Reagent D)
3. 加入xx微升反应液(Reagent E)
4. 加入xx微升底物液(Reagent F)
5. 放进30℃培养箱里静置3分钟
6. 加入40微升上述预处理的待测样品
7. 上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)
8. 即刻放进分光光度仪检测,此为样品非特异活性读数:340波长读数0分钟 -340波长读数5分钟
二、计算样品活性
1) 样品总活性和非特异活性计算
2)样品特异活性计算
特异活性=总活性-非特异活性
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