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技术文章
上海极威生物为大家介绍elisa样本的处理方法
点击次数：4374 发布时间：2017/6/6 15:25:33
ELISA实验是实验室最常见的实验方法之一，可用于elisa测定的标本十分广泛，包括体液（如血清、血浆）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液）、细胞培养上清、细胞、组织匀浆等均可作标本以测定其中某种成份。有些标本可直接进行测定，有些则需经预处理。下面我们来详细介绍一下各种样本具体的处理方法及保存：
ELISA常见样本之：血清样本：
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
Elisa常见样本之：血浆样本：
根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10％（v/v）抗凝剂（0.1M柠檬酸钠或1%heparin或2.0%EDTA.Na2）混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
Elisa常见样本之：尿液、胸腹水、脑脊液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
Elisa常见样本之：细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
Elisa常见样本之：细胞样本：
检测细胞的成份时，对于贴壁细胞，去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。加入适量裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞10秒后，细胞就会被裂解。对于悬浮细胞，离心收集细胞，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍.加入适量裂解液,用枪吹打把细胞吹散。用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装然后再裂解。充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续操作。
Elisa常见样本之：组织标本：
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS或组织蛋白萃取试剂，缓冲液中可加入蛋白酶抑制剂。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
以上为elisa实验中常见样本的处理方法详细介绍，其他样本处理方法可来电咨询上海极威生物科技有限公司。
原创作者：上海极威生物科技有限公司
