XBTGT2220施耐德人机界面XBTGT2220

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施耐德中国区总代理特优价供应全系列施耐德人机界面XBTGT2110XBTGT5230 XBTOT2110

XBTN400XBTN401XBTR400XBTR410XBTR411

XBT N/R文本屏附件及软件XBTZ945XBTL1001MXBTL1003M

XBTGT触摸屏XBTGT1100XBTGT1130XBTGT2110XBTGT2120XBTGT2130XBTGT2220XBTGT2330XBTGT4230XBTGT4330XBTGT4340XBTGT5230XBTGT5330XBTGT5340XBTGT6330XBTGT6340XBTGT7340XBTGT触摸屏附件XBTZG925XBTZG935XBTZ9780990NAA26320XBTZG9721XBTZGPDPXBTZGUMPXBTZGCO1XBTZGCO2XBTZGCO3XBTZGCO4XBTZGFIXXBTZGM128XBTZGM256XBTZGADTXBTZG909XBTZG919XBTZG939XBTZGCOM1XBTZGCOM2XBT ZGUSBXBT ZGI232XBT ZGI485XBTZG999VJDSNDTGSV45MVJDSUDTGSV45MVJDSUDTGAV45MVJDGNDTGSV45MVJDTNDTGSV45MVJDFNDTGSV45M

Smart IPCMPC ST21 NAJ 10T

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MPC ST52 NDJ 10T

MPC ST52 NDJ 10R

Compact IPCMPC KT22 NAA 00N

MPC KT22 NAX 00N

MPC KT22 NAX 00R

MPC KT52 NAA 00N

MPC KT55 NAX 00N

Modular IPCMPC EN0 5NAX 00N

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MPC DN0 5NAX 00N

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IPC 附件MPCYN00CFE00NMPCYN00CF100NMPC YN00CF152TMPC YK02 RAM 512MPC YK05 RAM 512MPC YDE RAM0 512MPC YDE RAM1 024MPC YN0 0CDW ROMMPC YN0 0PWS AC4MPC YN0 0PWS DC4MPC YN0 0SFW 20N

ABB现货,价格特优,数量有限,售完为止哦!!FP:E3 WHR-HR 3P NEW OESA630D3PL1 OETL250K4T4H250 PR222DS/P-LSI R100 FF 3PFP:F5 5000 (10CO) WRV 3PS3N160 R125 TM 10ITH FF 4P+RC212-R/3VS2N160 R125 TM 10Ith PMP 3P

施耐德变频器 停产库存特价销售,欢迎来电 先询先得ATV31H075N4AATV31HU11N4AATV31HU22N4AATV31H055N4A  EZD400E3320ELZATV61HD90N4 

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EPP2221 EPP2221EPP2221电气阀门定位器

简单介绍 EPP2000系列 电气阀门定位器与气动执行机构配套使用,将输入4-20mADC的信号转换输出空气压力,控制执行机构的动作。同时根据执行机构的行程进行反馈,从而使执行机构的行程能按控制信号进行精确定位。 EPP2000系列 电气阀门定位器能用于单动作型和双动作型执行机构。 
 
一.概述     EPP2000系列 电气阀门定位器与气动执行机构配套使用,将输入4-20mADC的信号转换输出空气压力,控制执行机构的动作。同时根据执行机构的行程进行反馈,从而使执行机构的行程能按控制信号进行精确定位。     EPP2000系列 电气阀门定位器能用于单动作型和双动作型执行机构。
二.特点 1、适用于小容量及大容量执行机构:采用了载荷控制弹簧,选择相应的弹簧后就能获得最适合于该执行机构的定位器。 2、耗气量小:放大器的耗电量小,容量大。 3、可以选择输出特性:由于反馈机构中有凸轮装置,因此可以选择标准特性以外的输出特性。 4、各种反馈方式对应的型号:      只要更换凸轮装置,就可以用于以下对应的执行机构。      *直行程执行机构:标准型-------------------------------EPP2□1□      *角行程执行机构:标准型------------------------------ EPP2□2□ 5、易变换成反作用放大器:单作用执行机构在需要反作用控制时,正作用型放大器很容易变换成反作用型放大器。 6、耐压防爆型可在现场进行调整:由于信号4-20mADC输入端接头及线圈部位的封装呈耐压防爆结构,因此在进行检修及行程调整时,可以在现场防爆区域内拆除定位器外壳。 7、本质安全的构造有着广阔和适用范围:接线盒及线圈有着本质安全型的构造,因此与专用的齐纳安全栅组合使用能使力矩线圈适用于所有危险气体的场所包括0区,使用环境温度范围为-40~+60℃。
 
产品特点
 
三.型号、规格
 
 
例:EPP2322:表示本安型、角行程、双作用、 电气阀门定位器。       EPP2111-AS:表示隔爆型、直行程、单作用、 电气阀门定位器带关联匹配组合空气过滤减压阀。       注:耐压防爆型隔爆型的使用环境温度范围为-20~+60℃。       本质安全型本安型的使用环境温度范围为-40~+60℃。
 

 
  订货时请注明产品名称、型号。本公司产品出厂均按正作用定位器装配,因此,如在下列情况中使用,订货时必须说明,以便按用户需要装配出厂。 ●需配角行程阀 ●需反作用定位器 ●需配反作用执行机构的定位器 ●需配100mm行程执行机构 ●需配精小型调节阀 ●需分程控制 ●其他特殊要求

 

质量、欢迎咨询洽谈!!!
上海工豪自控阀门制造厂
联 系 人:古洁
销售热线:1312 777 0500
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该公司产品分类: 电气阀门定位器

西门子CPU222模块6ES7212-1AB23-0XB0

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西门子PROFIBUS通讯接头6ES7972-0BB42-0XA0,西门子PROFIBUS通讯接头6ES7972-0BB42-0XA0西门子PROFIBUS通讯接头6ES7972-0BB42-0XA0

35角度,90角度,快速接头,180角度,带编程口,不带编程口

西门子统称DP电缆,最常规的DP电缆,防干扰信号DP电缆,可弯曲上万次的DP电缆!可通讯的DP电缆!它的型号是6XV1830-0EH10,它的包装规格最大1000米,500米,起售20米,我们对质量的标准要求德国原装进口!

西门子总线电缆:6XV1830-3EH10 PROFIBUS 拖缆6XV1830-3EH10 Profibus DP 软电缆6XV1830-0EH10 profibus总线电缆6XV1830-0EH10 Profibus DP 电缆6XV1840-2AH10 profibus总线电缆6XV1830-3EH10 profibus总线电缆6XV1830-5FH10 Profibus PA 电缆6XV1850-0AH10 工业以太网电缆

西门子PROFIBUS快速标准电缆,FastConnect 电缆,配置:总线电缆,供电电缆,RS 485 总线连接器,830-1T 连接电缆,830-2 连接电缆,

西门子供电电缆,M12-180/M12-180 电源连接电缆,用于 ET200 电源,预装配电缆,带 M12 连接器 和 M12 A 编码插座连接器,5 针,0.3m。

西门子供电电缆:M12-180/M12-180 电源连接电缆,用于 ET200 电源,预装配电缆,带 M12 连接器 和 M12 A 编码插座连接器,5 针,0.5m。

西门子供电电缆:M12-180/M12-180 电源连接电缆,用于 ET200 电源,预装配电缆,带 M12 连接器 和 M12 A 编码插座连接器,5 针,1.0m。

西门子总线电缆:SIMATIC NET, PROFIBUS ECOFAST 混合电缆, 拖缆, 带 4xCu(1.5 平方毫米) 和 2xCu(0.64 mm) 电线, 屏蔽, 按米销售, 最大长度: 1000m, 最小订购量: 20 m。

西门子总线电缆:SIMATIC NET, PROFIBUS ECOFAST 混合电缆, 拖缆, 带 4xCu(1.5 平方毫米) 和 2xCu(0.64 mm)电缆, 非预装配,优选长度 20m。

西门子总线电缆:SIMATIC NET, PROFIBUS ECOFAST 混合电缆, 拖缆, 带 4xCu(1.5 平方毫米) 和 2xCu(0.64 mm)电缆, 非预装配,优选长度 50m。

西门子电缆SIMATIC NET, 830-1T PROFIBUS 连接电缆,用于连接 数据端口,预装配,在电缆二端各装有一个 9 针 Sub-D 插头,1.5m。

西门子通讯电缆SIMATIC NET, PROFIBUS 快速标准电缆 GP, 2 芯, 屏蔽, 为快速安装而特殊设计,最大长度: 1000m, 最小订购数量: 20m, 按米销售。

西门子电缆:SIMATIC NET, PROFIBUS 标准总线电缆, 2 芯, 屏蔽, 为快速安装而特殊设计, 20 m。

 

该公司产品分类: 西门子驱动器 S7-300 西门子S7-200 西门子电缆 西门子维修 西门子软件 西门子6EP电源模块 西门子模块 西门子网卡 西门子主板 西门子软启动 接头 插头 S7-200CN S7-1200控制器 S7-400控制器 S7-300控制器 S7-200控制器 工程型变频器 直流变频器 MM440变频器

01NR.1000.32227.10VG.25G.25.B.V.-.S1 风电齿轮箱滤芯

 风电齿轮箱滤芯适用于华锐、东汽、GE、金风、维斯塔斯、运达、明阳、联合动力、歌美飒等。固安县宏信过滤器材有限公司生产的风电齿轮箱滤芯主要型号有:风电齿轮箱滤芯2600 R 010 BN4HC/-B4-KE50  HYDAC风电齿轮箱滤芯1284461 1300R010BN4HC/-B4-KE50风电齿轮箱滤芯01NR.1000.32227.10VG.25G.25.B.V.-.S1 风电齿轮箱滤芯01NR.1000.6VG.10.B.V.-   风电齿轮箱滤芯HC8300FKS24H-YC11风电齿轮箱滤芯HC8300FKS39H-YC11A  风电齿轮箱滤芯HC8300EOJ6H-YC11B PALL颇尔风电齿轮箱滤芯7953834-F10 PALL颇尔风电齿轮箱滤芯FD70B-602000A014风电齿轮箱滤芯FD70B-602000A015风电齿轮箱滤芯FD70B-602000A016风电齿轮箱滤芯MEH1449RNTF10N/M50固安县宏信过滤器材有限公司供应01NR.1000.32227.10VG.25G.25.B.V.-.S1 风电齿轮箱滤芯 联系电话:15932638765
该公司产品分类: 旋挖钻机滤芯 风电滤芯

齿轮泵1517222330齿轮泵1517222330

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贵公司采购负责人您好:     我是厦门东乾机电设备有限公司的业务负责人陈小姐。希望您能在百忙中看看我们的公司简介。其经营的品牌有: 液压产品:Bosch Rexroth博世力士乐 SAUER DANFOSS萨奥丹佛斯 PARKER DENISON派克丹尼逊 HAWE哈威 EATON VICKERS伊顿威格士日本NSK 瑞典SKF 德国FAG 美国MAC 德国internormen英德诺曼 BeDOOK 比度克日本不二越NACHI 贺德克HYDAC 万福乐WANDFLUH,主要适用于工程机械、工业机械、船舶机械高压流体产品:美国SPM、美国FMC。欢迎广大需求者的询价,本公司将以低优惠价格、短货期给您!具体品牌和系列型号:力士乐及派克长期备有现货米森各种规格的砂泵,如:10*8*14  8*6*14、8*6*11、6*5*14等等力士乐:A10VSO、A4VSO及A4VG系列泵,马达及一些常规阀:如:电磁换向阀:4WE6/10 4WEH10/16/25/32 等等单向阀:S6/8/10/15/20/25/30A1.0、M-SR10/15/20/25/30 Z1S6/Z1S10/Z1S16/Z1S22/Z2S6/Z2S10/Z2S16SL10/20/30  SV10/20/30 等等溢流阀:DBDH(S)6/10/20/30、DBW10/20/30  ZDB6/10VA(VP)   Z2DB6/10VC(VD) 等等减压阀:ZDR6/10DA(DP)…/Y(M)   DR10/20/30…/Y 等等顺序阀:DZ10/20/30…/Y(M)  等等节流阀:z2FS6/10/16/22  MG(MK)6/8/10/15/20/30 等等调速阀:2FRM5/6/10/16  等等压力继电器:HED1/2/3/4/8OA(OH/OP)  等等威格士:双联泵、单联泵、常规阀萨澳:90系列马达、泵及其他系列泵、马达如:柱塞泵90R100MAINN80P3F1E03GBA353524柱塞泵90R75MAIBC60P351D03GBA323224柱塞马达MF22-031A-45 及PV22系列的马达丹佛斯摆线马达,如:OMP8- 151-0611、OMP160 -151 -0614、OMP50 -151-0610、OMP315-151-0617、OMP40-151-0092、OMS315-151F0506  OMP40-151-0642  、OMP80-151-0611 、OMP160-151-0614 川崎:柱塞泵如:K3V112DT-1V7R-1N29 、T5V80DP-1K2R-2N7C   K3V63DT-1YOR-9NOQ    、K3V63DT-1ZOR-9NOQ日本多路阀:U28-119以上产品价格优势,货期短!有需要者欢迎来电咨询!我们拥有:品牌优势、价格优势、技术优势、服务优势。
业务:陈小姐   QQ: 865830896 电话:传真:
该公司产品分类: 液压元件

求购yl_Agilent N5222A 微波网络分析

求购yl_Agilent N5222A 微波网络分析:13537229325欧阳R:13537229325电话:传真:QQ:   1226365851回收工厂闲置/倒闭电子仪器,个人处理仪器,欢迎来电.

回收工厂闲置/倒闭电子仪器,个人处理仪器,欢迎来电.

N5222A PNA 微波网络分析仪Agilent N5222A主要特性与技术指标 微波网络分析中最的工具

的性能帮助您在保护频段极低的情况下提高良率,提供设计验证和产品测试间的数据关联:

?10 MHz 至 26.5 GHz?2 端口(单信号源)或 4 端口(2 个内置信号源)?127 dB 系统和 132 dB 接收机动态范围、32,001 个点、200 个通道、15 MHz 中频带宽?高输出功率(+13 dBm)和宽功率扫描范围(38 dB)?动态精度:在测试端接口使用 0.1 dB 压缩和 +12 dBm 输入功率?在 10 Hz 中频带宽时仅有 -114 dBm 的低本底噪声描述 满足您预算的高性能网络分析仪PNA 系列是业界性能的微波网络分析仪,可用于无源和有源器件测试。 目前它提供以下五种频率型号供您选择:13.5、26.5、43.5、50 或 67 GHz,为您的 PNA 定制适当的性能等级,以满足您的特定预算和测量需求。

Agilent PNA 用于测试各种无源和有源器件,例如滤波器、双工器、放大器和变频器。 PNA 具有高性能特征,是进行元器件表征以及毫米波、信号完整性和材料测量的理想解决方案。

   本公司  回收  供应  租赁:示波器 网络分析仪 综合测试仪  频谱分析仪  信号发生器  噪声系数分析仪  音频分析仪 数字万用表  表程控电源  功率计  频率计  阻抗分析仪 视频分析仪  函数信号发生器  LCR电子测试仪 电子负载万 用表校准仪  示波器校准仪  高压机    数据采集器   接收/发射机   测量接收机  电缆/天线分析仪  调制度分析仪  蓝牙综测仪  GPIB卡等.

该公司产品分类: 校准仪 变频电源 彩色分析仪 信号发生器 无线测试系统 接收机 蓝牙测试仪 综合测试仪 电源 网络分析仪 万用表 数据采集仪 数据采集卡 GBIP-USB 天馈线测试仪 时钟发生器 LCR 测试仪 直流电源 频谱分析仪 示波器

CNI3222-C24温度过程应变PID控制器美国OMEGA欧米茄

CNI3222-C24温度过程应变PID控制器美国OMEGA欧米茄产品特点:

高精度:读数的±0.03%,0.5°C (±0.9°F)完全可编程彩色显示屏用户易于使用,易于配置提供软件完全自动调谐PID控制通用输入:热电偶、RTD、过程电压/电流、应变RS232和RS485串口通讯(可选)产品概述:OMEGA属于小巧玲珑的iSeries 控制器,它采用普及程度不断扩大的 1/32 DIN尺寸(22.5 x 45 mm开孔)。 CNi32是拥有纤巧1/32 DIN外形的先进、精确的仪器,但其配置仍然很容易。与其它任何1?32 DIN控制器相比,CNi32能够处理更多热电偶、RTD、过程电压和电流输入。CNi32是款可提供24 Vdc @ 25 mA内置激励电压的1/32 DIN的仪器。CNiS32可为桥式传感器提供5 Vdc @ 40 mA或10 Vdc @ 60 mA内置激励电压。安装通讯选件后,可以通过将外部激励连接到传感器引线来使用外部激励并且保持比率计量操作。内部与外部激励均支持4线制或6线制桥式配置。非比率计量操作受电压和电流传感器的支持,并且在制造和校准过程中非比率计量在测量偏差和毫伏输出时也很有用。此型号还具有10点线性化,这让用户能够线性化来自各种极端非线性化传感器的信号输入。CNi32推出了许多其它任何1/32 DIN仪器至今仍然不能提供的独有功能。CNi32是款配备完全可编程显示屏的1/32 DIN控制器,其显示屏可针对任何设定值或报警值在绿色、琥珀色和红色之间更改颜色。独有的9段式LED字符显著改善了字母数字的显示效果。CNi32是首款提供2个C型继电器的1/32 DIN控制器,而普通1?32 DIN控制器使用的是单掷继电器。CNi32是首款同时提供RS232和RS422/485串口通讯功能的1?32 DIN控制器(C24选件)。ASCII协议可从菜单中选择。

产品型号   产品描述CNi3222-C24  1/32 DIN控制器,带两个SSR输出,加RS-232和RS-485串口CNi3233  1/32 DIN控制器,带两个继电器输出CNi3252-C24  1/32 DIN控制器,带有一个模拟和一个SSR输出,加RS-232和RS-485串口CNi3253-DC  1/32 DIN控制器,带有一个模拟和一个继电器输出,加90-240V AC/DC电源CNi3222  1/32 DIN控制器,带有两个SSR输出CNi3224-C24  1/32 DIN控制器,带一个SSR输出和一个单脉冲输出,加RS-232和RS-485串口CNi3244-C24  1/32 DIN控制器,带有两个直流脉冲输出,加RS-232和RS-485串口CNi3253  1/32 DIN控制器,带有一个模拟和一个继电器输出CNi3254-C24  1/32 DIN控制器,模拟和脉冲直流输出,加RS-232和RS-485串口DPi32  1/32 DIN面板仪表,无控制输出DPi32-DC 1/32 DIN面板仪表,无控制输出,10-34V AC/DC电源DPi32-C24 1/32 DIN面板仪表,无控制输出,RS-232和RS-485通讯DPi32-C24-DC  1/32 DIN面板仪表,无控制输出,RS-232和RS-485通讯,10-34 V AC/DC电源出厂设置(需要网络选项)-FS  出厂设置和配置-FS(RTD-1N)  针对MIL-T- 7990B镍RTD输入定制CNiS型号,0 ~ 200°C (32~ 392°F)-FS(RTD-2N)  针对MIL-T- 7990B镍RTD输入定制CNiS型号,-40 ~ 300°C(-40 ~ 572°F)软件(需要网络选件)OPC-SERVER LICENSE  OPC服务器/驱动程序软件许可证配件DPP-1  1?32 DIN面板开孔工具EIT-W-485  工业级iServer Microserver?,可支持32个设备图片;

该公司产品分类: 水质分析仪/多参数水质分析仪 润滑油脂 放大镜 推拉力计 其他 德国MN测试纸 酸碱度/PH计 浊度仪 测振仪 余氯分析仪 检相计 张力计 光泽度仪 细菌检测仪 温度记录仪 数据记录仪 硬度计 试验机/测试架 扭力扳手 扭矩测试仪

EPP2221电气阀门定位器 8元EPP2221电气阀门定位器 8元

 EPP系列电气阀门定位器

【免费咨询热线】135 6422 5483; 陈 工; QQ:110618292厂家直接供货

 
 
 
 
 
 
     如:EPP2111;EPP2112;EPP2121;EPP2122;EPP2211;EPP2221;EPP2212; EPP2222;EPP2322;EPP2311;EPP2000系列电气阀门定位器是引进国外最新设计,由本厂开发成功的产品。其技术性能均达到国外同类产品水平,并经“国家级仪器仪表防爆安全监督检验站"检验合格,获得国家级防爆合格证书。本定位器的作用是把调节装置输出的电信号变成驱动调节阀动作的气信号,而且具有阀门定位功能,即克服阀杆摩控力,抵消被调价质压力变化而引起的不平衡力,从而使阀门开度对应于调节装置输出的控制信号,实现正确定位。由于本定位器具有防爆结构,故能使用于爆炸危险场所。
 
EPP2000系列电气阀门定位器
该公司产品分类: 执行机构 电动调节阀 气动调节阀 自力式调节阀 电磁阀 阀门定位器

人小细胞肺癌细胞NCI-H2227系

    产品特点
特点:细胞代数为4-5代左右
包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC、sciencell、ICLC
货期:1-2周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真或E-mail致销售人员,我们将尽快为您解决。
形态:上皮细胞样参数规格
规格:5×105cells/瓶  70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶
为使客户能尽快开展实验,发货的原代细胞均处于对数生长期,且每次发货为汇合率达到70%的细胞,收到细胞后即可开展实验。
 产品资料
     本提供的人小细胞肺癌细胞NCI-H2227系来自新鲜的组织,按照标准操作流程分离培养。研发能提供细胞最佳的生长条件,降低杂细胞污染,保证不同批次间细胞质量的稳定。同时,公司还建立了严格的细胞鉴定流程,所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测,保证细胞纯度在90%以上;同时也需经过微生物检测,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
 
细胞冻存和复苏
实验方法原理
细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。
 
实验材料细胞
试剂、试剂盒D-Hanks液小牛血清培养液青霉素链霉素胰蛋白酶HClNaHCO3DMSO甘油
仪器、耗材微量加样枪吸头离心管冻存管枪头胶塞移液管玻璃瓶红血球计数板记号笔医用橡皮膏移液枪超净工作台离心机恒温水浴箱冰箱倒置相差显微镜培养箱液氮冰箱
操作流程
一、材料准备
 
1.  仪器:净化工作台、 离心机、恒温水浴箱、冰箱(4℃、-20℃、-70℃)、倒置相差显微镜、培养箱、液氮冰箱。
 
2.  玻璃器皿:吸管(弯头、直头)、 培养瓶、玻璃瓶(250ml、100ml)、废液缸。
 
3.  塑料器皿: 吸头、枪头、胶塞、移液管(10ml)、15ml离心管、冻存管(1~2ml)。
 
4.  其他物品:微量加样枪、红血球计数板、记号笔、医用橡皮膏、移液枪。
 
5.  试剂:D-Hanks液、小牛血清、培养液、双抗(青霉素、链霉素)、胰蛋白酶(0.08%)、1NHCl、7.4%NaHCO3、DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油。
 
二、人小细胞肺癌细胞NCI-H2227系细胞冻存
 
1.  配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液。
 
2.  取对数生长期的细胞,用胰蛋白酶把单层生长的细胞消化下来,悬浮生长的细胞则直接将细胞移至15ml离心管中。
 
3.  离心1 000 rpm,5 min。
 
4.  去除胰蛋白酶及旧的培养液,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml。
 
5.  将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml。
 
6.  在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者。
 
7.  冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2 h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。
 
三、 细胞复苏
 
1.  从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。
 
2.  从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀。
 
3.  离心, 1 000 rpm,5 min。
 
4.  弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养。
 
5.  次日更换一次培养液,继续培养。
 
适用范围
1.  从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但最好为对数生长期细胞。在冻存前一天最好换一次培养液。
 
2.  将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免冻伤。
 
3.  冻存和复苏最好用新配制的培养液。
其他
一、冻存和复苏的原则:慢冻快融
 
当人小细胞肺癌细胞NCI-H2227系冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶。
 
如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。
 
二、慢冻程序
 
1.  标准程序:采用细胞冻存器
 
当温度在-25 ℃以上时,  1~2 ℃/min;
 
当温度达-25 ℃以下时, 5~10 ℃/min;
 
当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。
 
2.  简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2 ℃的速度,在40 min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。
 
3.  传统程序:冷冻管置于4℃ 10 分钟→ -20℃ 30 分钟→ -80℃ 16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽长期储存。
 
三、低温保护剂的应用
 
在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。
 
常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。
 
四、细胞冻存方法
 
1.  预先配制冻存液
 
(1)10%DMSO + 细胞生长液(20%血清+基础培养液)
 
(2)10%甘油+ 细胞生长液(20%血清+基础培养液)
 
2.  取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液, 用吸管吹打制成细胞悬液(1×106 ~ 5 ×106细胞/ml)。
 
3.  加入1 ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。
 
五、保存细胞的复苏方法
 
1.  快速解冻
 
冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1 分钟内全部融化(不要超过3 分钟)。
 
2.  解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。
 
3.  如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
人胚肾细胞293(HEK-293)贴壁上皮细胞样
人膀胱癌细胞5637贴壁上皮细胞样
人胚肾细胞293A 贴壁上皮细胞样
人前列腺癌细胞22RV1贴壁上皮细胞样
人胚肾细胞293T贴壁上皮细胞样
小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1贴壁成纤维细胞
小鼠乳腺癌细胞4T1贴壁上皮细胞样
人T细胞白血病细胞6T-CEM悬浮淋巴母细胞
人肾细胞腺癌细胞769-P贴壁上皮细胞样
人肾透明细胞癌细胞786-O(786-0)贴壁上皮细胞样
人高转移肺癌细胞95-D贴壁上皮细胞样
人脑胶质瘤细胞A172贴壁成纤维细胞
人卵巢癌细胞A2780贴壁上皮细胞样
人恶性黑色素瘤细胞A-375贴壁上皮细胞样
人表皮癌细胞A-431贴壁上皮细胞样
人非小细胞肺癌细胞A549贴壁上皮细胞样
人非小细胞肺癌细胞A-673贴壁多边形
小鼠皮下结缔组织细胞A9贴壁成纤维细胞
人胚肾细胞AAV-293贴壁上皮细胞样
人涎腺腺样囊性癌细胞Acc-2贴壁上皮细胞样
人肾癌细胞ACHN贴壁上皮细胞样
人胃腺癌细胞AGS贴壁上皮细胞样
小鼠巨噬细胞Ana-1贴壁/悬浮混合巨噬细胞
人卵巢癌细胞Anglne贴壁上皮细胞样
大鼠胰腺外分泌细胞AR42J贴壁上皮细胞样
人视网膜上皮细胞ARPE-19贴壁上皮细胞样
人转移胰腺腺癌细胞AsPC-1贴壁上皮细胞样
小鼠垂体瘤细胞AtT-20半贴壁小圆形(成串)
小鼠黑色素瘤细胞B16贴壁成纤维细胞
人乳腺癌细胞Bcap-37贴壁上皮细胞样
人肝癌细胞BEL-7402贴壁上皮细胞样
人肝癌细胞BEL-7404贴壁上皮细胞样
注意事项购买人小细胞肺癌细胞NCI-H2227系要点:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的完全培养基。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
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