T-2 毒素试剂盒 |
ELISA技术的-操作要点
的试剂,良好的仪器和正确的操作是ELISA检测结果的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点.本文将叙述板式注意要点,要详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出的结果.
1 标本的采取和保存
可用作 ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清),分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,粪便)等。均可作标本以测定其中某种抗体或抗原 成份.有些标本可直接进行测定(如血清,尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物).大部分ELISA检测均以血清为标本 .血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清.制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固,血块收缩后即可取得.除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本.在ELISA中血浆和血清可同等应用.血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色.血清标本宜在新鲜时检测.如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应.如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深.一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存.冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡.混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测.反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存.保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂.
2 试剂的准备
按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂. ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的.自配的缓冲液应用pH计测量较正.从冰箱中取出的试 验用试剂应待温度与室温平衡后使用.试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存.
3 加样
在 ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物.加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部 ,并注意不可溅出,不可产生气泡.
备注:只限参考,具体操作需按说明书。请来电咨询。
(注:本试剂只用于科研,欢迎来电咨询!)如需订购请联系24小时为您服务:
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、黄曲霉毒素试剂盒和黄曲霉毒素混合标准以及测定方法 Cosmosil 5C18-MS-11的简介:据2010年中药典规定:以十八烷基键合硅胶为填充剂;以甲醇-乙腈-水为流动相,流速为每分0.8mL;采用柱后衍生法检测,衍生溶液为0.05%的碘溶液,衍生化泵流速每分钟0.3mL,衍生化温度70℃;以荧光检测器检测。两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5.(2010年中药典部 附录61)二、黄曲霉毒素试剂盒和黄曲霉毒素混合标准以及测定方法 Cosmosil 5C18-MS-11的技术参数:据2010年中药典规定:以十八烷基键合硅胶为填充剂;以甲醇-乙腈-水为流动相,流速为每分0.8mL;采用柱后衍生法检测,衍生溶液为0.05%的碘溶液,衍生化泵流速每分钟0.3mL,衍生化温度70℃;以荧光检测器检测。两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5.(2010年中药典部 附录61)
1.试剂盒描述
REAGEN T-2毒素检测试剂盒是用竞争性酶联免疫的方法定量分析谷类、饲料、干肉、干鱼、种子、牛奶中T-2毒素,该试剂盒有以下特点
高回收率(80-105%),快速(10-20min),成本低
高灵敏度(1ppb)
高重复性。
检测过程只需要不到1小时。
2.试剂盒原理
REAGEN T-2毒素检测试剂盒基于竞争性酶联免疫检测原理,毒素抗原包被在酶标板孔内,分析过程中,样品和一抗、酶标二抗加入微孔中,如果样品中有毒素抗原,就可竞争与抗体结合,阻止抗体与包被的抗原结合,酶标二抗可与一抗结合从而于酶标板上包被的抗原结合。经酶催化底物发生反应颜色变化,颜色的深浅与目标物的浓度成反比。
3.检测下限
检测物质 | 检测下限(ng/g) |
肉/鱼/谷类/饲料/种子 | 3.5 |
牛奶 | 10 |
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应用领域: 仅供科研使用,不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。
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