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发布兔α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA试剂盒有效期

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上传时间:2015/5/18 22:42:21

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上 传 者:上海纪宁试剂供应商

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                                                    兔α甘露糖苷酶(α  Manase)酶联免疫分析
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔α甘露糖苷酶 (α  Manase)α甘露糖苷酶(α  Manase)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入α甘露糖苷酶(α  Manase),再与 HRP标记的α甘露糖苷酶(α   Manase)抗体。用纯化的兔
形成抗体抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP  酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的α甘露糖苷酶 (αManase)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中兔α甘露糖苷酶(α  Manase)浓度。
操作兔α甘露糖苷酶(α  Manase)elisa试剂盒步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50?l,待测样品孔中先加样品稀释液 40?l,然后再加待测样品 10?l(样品最终稀释度为 5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后37℃温育30分钟。30倍稀释后备用
配液:将 30倍浓
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体甩干,每孔加满洗涤液,静重复 5次,拍干。30秒后弃去,如此
加酶:每孔加入酶标试剂 50?l,空白孔除外。
温育:操作同 3。
洗涤:操作同 5。
显色:每孔先加入显色剂 A50?l,再加入显色剂 B50?l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.以标准物的浓度为横坐标, OD值为纵坐标,在坐标纸上,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与  OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意兔α甘露糖苷酶(α  Manase)ELISA试剂盒事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有析出,稀释时可在浴中加温助溶,洗涤时不影响
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值牛于标准品孔第一孔的 OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月

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