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ELISA试剂盒的主要常用类型及步骤
点击次数:362 发布时间:2015/9/14 10:01:51
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李*
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1. 间接法测抗体
间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体(二抗)以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法。操作步骤如下:
1)将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原,洗涤除去未结合的抗原及杂质。
2)加稀释的样本,保温反应。样本中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。 elisa试剂盒经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,样本中的其他成份在洗涤过程中被洗去。
3)加酶标抗抗体。 ELISA试剂盒固相免疫复合物中的抗体与酶标抗抗体结合,从而间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量与样本中受检抗体的量正相关。
2. 双抗体夹心法测抗原
双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:
1)将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。
2)加受检样本,保温反应。样本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。
3)加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。 ELISA试剂盒彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与样本中受检抗原的量相关。
原创作者:上海纪宁试剂供应商


