小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA检测试剂盒

小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA检测试剂盒

【中文名称】小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA检测试剂盒

【英文名称】Mouse Heat Shock Protein 90,Hsp-90 ELISA KIT

【库存状态】现货供应

【保 存】2-8℃,避光保存

【供应的种属】人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物elisa试剂盒等

【检测目的】用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞

培养上清、组织匀浆等标本

小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA检测试剂盒试验原理：
小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA检测试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。

小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA检测试剂盒试剂盒内容及其配制

小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA检测试剂盒 操作步骤：

方法一　用于检测未知抗原的双抗体夹心法：

1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中

加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。

2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性

对照孔及阳性对照孔)。

3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。

4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。

5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依

据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O·D值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，

以空白对照孔调零后测各孔O·D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

方法二　用于检测未知抗体的间接法：

用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml，

每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。

↓

加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔

中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)

↓

于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml，

37℃孵育30-60分钟，洗涤,最后一遍用DDW洗涤。

↓

其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。

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