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人肿瘤相关物质 (TAM)elisa,试剂盒价格

点击次数:251 发布时间:2014/6/23 11:12:25

人肿瘤相关物质 (TAM)elisa,试剂盒价格

人肿瘤相关物质 (TAM)elisa,试剂盒价格,促销 酶联免疫分析      
试剂盒使用说明书      
本试剂盒仅供研究使用。 
检测范围::: :                                                         96T 
3 IU/ml -100 IU/ml 
 
使用目的::: : 
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中肿瘤相关物质(TAM)含量。 
实验原理 
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肿瘤相关物质(TAM)水平。用纯化的人肿瘤
相关物质(TAM)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤相关
物质(TAM),再与HRP标记的肿瘤相关物质(TAM)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体
复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸
的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤相关物质(TAM)呈正相关。用酶
标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人肿瘤相关物质(TAM)
浓度。   
试剂盒组成  
1  30倍浓缩洗涤液  20ml×1瓶  7  终止液  6ml×1瓶 
2  酶标试剂  6ml×1瓶  8  标准品(200 IU/ml)  0.5ml×1瓶 
3  酶标包被板  12孔×8条  9  标准品稀释液  1.5ml×1瓶 
4  样品稀释液  6ml×1瓶  10  说明书  1份 
5  显色剂A液  6ml×1瓶  11  封板膜  2张     
6  显色剂B液  6ml×1/瓶  12  密封袋  1 个 
标本要求   
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 
操作步骤 
1.  标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。 
100 IU/ml  5号标准品  150µl 的原倍标准品加入150µl标准品稀释液 
50 IU/ml  4号标准品  150µl 的5号标准品加入150µl标准品稀释液 
25 IU/ml    3号标准品  150µl 的4号标准品加入150µl标准品稀释液 
12.5 IU/ml  2号标准品  150µl 的3号标准品加入150µl标准品稀释液 
6.25 IU/ml  1号标准品  150µl 的2号标准品加入150µl标准品稀释液 
 
 
人肿瘤相关物质 (TAM)elisa,试剂盒价格,促销2.  加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
 
 
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl,待测样品孔中先加样品稀释液40µl,
然后再加待测样品10µl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 
3.  温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。       
4.  配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 
5.  洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。 
6.  加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。   
7.  温育:操作同3。 
8.  洗涤:操作同5。 
9.  显色:每孔先加入显色剂A50µl,再加入显色剂B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10分钟. 
10.  终止:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 
11.  测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。  测定应在加终止
液后15分钟以内进行。 
操作程序总结::: : 
 
 
计算 
    以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
 
 
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。   
注意事项 
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。 
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值
大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计
算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 
6.底物请避光保存。 
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 
9.本试剂不同批号组分不得混用。 
保存条件及有效期 
1.试剂盒保存:;2-8℃。 
2.有效期:6个月 

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