白细胞介素-2

定义：主要由活化的CD4+T细胞和CD8+T细胞产生的具有广泛生物活性的细胞因子。是所有T细胞亚群的生长因子，并可促进活化B细胞增殖，故为调控免疫应答的重要因子，也参与抗体反应、造血和肿瘤监视。

【中文名称】： 白细胞介素-2

【简写拼音】： BXBJS-2

【英文名称】： Interleukin-2

【所属类别】： 免疫增强剂||其他抗肿瘤药及辅助治疗药

【别名】 白间素, 欣吉尔, T细胞生长因子 ,白细胞介素-2

【外文名】Interleukin-2 ,IL-2

【适应症】 白介素－2是一个分子量为14500的糖蛋白，它刺激已被特异性抗原或致丝裂因数启动的T细胞增殖。重组白介素－2可用于临床研究。主要用于肾癌、黑色素瘤和非何杰金淋巴瘤有效（Rossenberg）。LAK细胞代表1个有单核巨噬细胞，B和T淋巴细胞特征的异原的细胞体。这些LAK细胞似乎对癌细胞有特异作用。此外，LAK细胞（不象T细胞）介导杀伤不受MHC的约束。[1]

1 材料和方法：

　　1.1 制备粗制IL-2无菌采血，肝素抗凝，用RPMI1640按1∶1将血液稀释，然后重层于菲可液面上，以1 500r/min离心30min，取白细胞层，用RPMI1640洗2次，按1～3×10细胞/ml浓度加入10%胎牛血清RPMI1640，注入一装有磁棒的大瓶中，置37℃搅拌培养4天，取出，分装于50ml离心管中，1 500r/min离心20min，弃上清液，将细胞悬浮于1%胎牛血清RPMI1640培养液中，使细胞浓度为106细胞/ml。同时加入纯质PHA1～2μg/ml以及多种B淋巴母细胞株，使其浓度为106细胞/ml，37℃搅拌培养18～24h后，取出以1500r/min离心30min，取上清，用045μg滤膜过滤除菌，滤液即为粗制IL-2。

　2 制备精品IL2

　　2.1 硫酸铵沉淀与真空浓缩透析：在4℃下将硫酸铵粉末按50%饱和量加入上述粗制IL-2中，搅拌2h，12000g离心30min，取上清液，再加入80%饱和硫酸铵，4℃过夜，次日以12000g离心30min，弃上清液，将沉淀溶于1% PEG 6 000的1∶2 PBS溶液（pH值73）中，置真空负压浓缩透析器中透析浓缩至所需容量。

　　2.2 Sephadex G100凝胶过滤：用2×180cm的过滤柱及PBS（同上），以80ml/h流速过滤。将各管洗脱液用紫外分光光度计280nm检测其OD值。同时将几种不同分子量的标准蛋白也用相同条件过滤及检测其OD值，绘出IL-2及标准蛋白OD值的曲线。将各管洗脱液过滤除菌后，作白细胞生物活性试验，按试验结果绘出曲线，找出具有最高IL2活性的几管洗脱液，混合后，作下一步精制。

　　2.3 BlueSepharose层析：将上述混合后的洗脱液加入BlueSepharose柱中，流速约15ml/h，按每管10ml收集流出液，当样品全部流出柱中以后，用上述PBS洗涤样品柱，再用梯度NaCl溶液（从0075mol/L至06mol/L NaCl的PBS溶液）洗脱，按2ml/管收集洗脱液。NaCl 溶液梯度及流速均由梯度混合器调节控制。洗脱完毕后，作各管OD值及NaCl浓度的测定。各管洗脱液过滤除菌后，作出生物活性测定。将峰值前后的数管洗脱液混合，即为精制的IL2。置－20℃冰箱保存。

　　3 检定

　　3.1 活性测定用10%胎牛血清RPMI1640将上述IL2稀释为50%、25%、125%、625%，而后再将每个百分浓度以及100%浓度的IL2倍比稀释，自1∶2至1∶128，将每个稀释度分别加入多孔板的孔中，每孔01ml。然后取CT6细胞株（小鼠的IL2依赖性T细胞株），调整浓度为106细胞/ml，每孔加入01ml，同时用培养基代替IL2作对照。将多孔板培养24h后，取出按每孔1μci的浓度加H3标记胸腺嘧啶核苷继续培养4h。取出后用MESHⅡ细胞收集器过滤洗涤细胞，用β计数器测定各孔细胞的cpm。必要时按此结果绘出曲线，确定活性单位。

　　3.2 蛋白含量测定采用分光光度计，分别测得OD280及OD260，然后按下式计算：蛋白含量（mg/ml）=（144×OD280-075×OD260）×稀释倍数

　　3.3 毒性试验及细菌检查参考胸腺肽制备部分。

应用

【药理作用】 本品可促进T淋巴细胞增殖与分化，诱导具有细胞毒样活力的杀伤细胞，诱导及增强杀伤性T细胞、单核细胞、巨噬细胞的活力等。

【临床应用】 适用于慢性活动性乙型肝炎病毒感染等

【用法用量】 静脉滴注：每次2.5万-5万U，每日1次。

【不良反应】 常见发热、寒战等反应。1.消化系统：恶心、呕吐、腹泻、结肠局部坏死或穿孔。 2.呼吸系统：可致间质性肺水肿、呼吸性碱中毒。3.神经系统：可发生行为变化、认知障碍。4.心血管系统：可出现低血压、心动过速、心律失常等症状。5.血液系统：可出现中性粒细胞上升，淋巴及单核细胞下降。6.泌尿系统：出现少尿、体液潴留、氨质血症。可出现内分泌功能紊乱，血钙、血磷下降，维生素C缺乏。

【规格】 粉针剂:1000u,10000u, 10万u, 100万u.

注意事项：癫痫、严重低血压，心、肾功能不全，高热者禁用。孕妇、患有心脏病或肺部疾病、60岁以上者慎用。用药期间应定期查肝、肾功能。

原创作者：郑州唯尔生物科技有限公司