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产品展示
金牌供应 超低分子量蛋白质Marker I（3.3-22kD）
点击次数：493
价格：￥电议
更新日期：2026/8/25 0:22:18
生 产 地：中国大陆
产品型号：
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详细内容
金牌供应 超低分子量蛋白质Marker I（3.3-22kD）
●产品编号及规格：
10T（100μl）
● 储存条件：
-20℃保存，开封后有效期12个月。
● 产品简介：
本产品包含3种多肽和2种低分子量蛋白质组成，分子量范围为3.3kD-22kD。可以用来判断 SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。
● 使用说明：
1. 超低分子量多肽的蛋白电泳较常规的蛋白电泳更为复杂，请仔细参阅说明书后再进行操作。
2. 第一次收到该产品，室温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底，根据需要适量分装成小管，-20℃贮存，每次取一小管使用。
3. 取一管样品，常温彻底融化，95℃预热5分钟即可上样。上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来，0.75mm×5mm（厚度×宽度）的加样孔上样10μl，其他规格梳子请适当调整上样量。注：一次热处理后，未用尽样品-20℃保存；下次使用时只要室温完全融化混匀后即可上样，可以不用再加热处理。
4 .制胶：先配制分离胶，聚合后再配制浓缩胶。电泳时，80-100v跑30-60分钟左右，待指示前沿到达分离胶上沿时，把电压调至150-200v，至蓝色指示前沿至分离胶3/4位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要3-4个小时。注：如果电泳时间过短，染色时，指示前沿容易遮挡3.3kD条带。
5. 如果目的多肽大于5KD，电泳后可以直接染色后观察，不用固定；如果关心较小的多肽（小于5KD），电泳之后可将胶置于固定液中固定30分钟，再进行染色，能得到较好的蛋白条带；如果不固定直接染色，小蛋白会不清楚。如果使用配方7进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择本公司的考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液（目录号：RTD6201），该产品具有染色快，无毒，灵敏性高等特点，在小肽的染色中有更大的优势，是常规染色液的理想替代品。
6. 当用配方7进行染色时，由于超低分子量多肽极易从凝胶中浸出，因此染色时间不要太长，染色一般要1个小时左右（最多不要超过1.5小时）。
● 附：小分子蛋白质SDS-PAGE电泳试剂配制
| 1. 40%PAA（29:1）（配制浓缩胶） 丙稀酰胺 38.67 g 甲叉双丙稀酰胺 1.33 g 用ddH2O溶解后定容至100 ml，过滤后使用。 贮存：4℃ | 2. 40% PAA（19:1） （配制分离胶） 丙稀酰胺 38 g 甲叉双丙稀酰胺 2 g 用ddH2O溶解后定容至100 ml，过滤后使用。 贮存：4℃ | 3. 凝胶缓冲液（配制凝胶用） [3M Tris; 0.3% SDS; pH8.45] Tris碱 182g ddH2O 300ml 1.5 g SDS或15ml 10％ SDS 用HCl调pH值至8.45 用ddH2O定容至500ml 贮存：4℃ |
| 4. 10×阳极缓冲液（下槽缓冲液） [1M Tris pH8.9] Tris碱 121.1g ddH2O 400ml 用HCl调pH值至8.9 用ddH2O定容至500ml 贮存：4℃ 注：使用前稀释成1×阳极缓冲液使用。 | 5. 10×阴极缓冲液（上槽缓冲液） [1M Tris; 1M Tricine ;1% SDS; pH 8.3] Tris碱 121.14 g Tricine 179.2 g SDS 10g 用ddH2O溶解， 用HCl调节pH至8.25，定容至1000ml。 贮存：4℃ 注：使用前稀释成1×阳极缓冲液使用 | 6. 固定液 5％ 戊二醛溶液 注：此溶液现用现配。 |
| 7. 染色液 冰醋酸 100ml 考马斯亮蓝G-250 0.25g 水 900ml | 8. 脱色液 冰醋酸 100ml 水 900ml
| 9. 2×Tricine蛋白样品上样缓冲液（10ml） 1ml 1M Tris-Cl pH6.8 2.4ml 甘油 0.8g SDS 0.31g DTT（或者400μl β-巯基乙醇） 2mg 考马斯亮蓝G-250 用灭菌ddH2O定容至10ml 混匀分装-20℃贮存备用 |
超低分子量蛋白Marker凝胶的配制方法：
（一块0.75mm mini胶用量）
|
| 分离胶 | 浓缩胶 |
|
| 18％T, 5%C /6.0 ml | 5％T, 3.3%C/4 ml |
| 40% PAA（19:1） | 2.7 ml | / |
| 40% PAA （29:1） | / | 0.5 ml |
| 凝胶缓冲液 | 1.5 ml | 1 ml |
| 乙二醇（电泳纯） | 1.8 ml | / |
| ddH2O | / | 2.5 ml |
| 10％APS | 45 μl | 30 μl |
| TEMED | 9 μl | 6 μl |
