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小鼠II型胶原蛋白(Col II)ELISA检测试剂盒实验原理

点击次数:261 发布时间:2016/3/9 13:39:37
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小鼠II型胶原蛋白(Col II)ELISA检测试剂盒实验原理
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠II型胶原蛋白(Col II)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠II型胶原蛋白(Col II)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
小鼠II型胶原蛋白(Col II)ELISA检测试剂盒实验原理

原创作者:杰辉生物(北京)科技发展有限公司

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