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RNeasy Mini Kit74104试剂盒操作原理
点击次数：790 发布时间：2015/11/4 8:36:39
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刘**
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RNeasy Mini Kit74104试剂盒操作原理
原理
RNeasy Mini Kit可从少量的样本中高效纯化总RNA。RNeasy纯化技术整合了苯酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度，简化了总RNA纯化技术。纯化得到高品质的RNA，并且DNA残留水平达到最低。
操作流程
RNeasy Mini Kit可从10–1 x 107个动物或人类细胞中、0.5–30 mg动物或人类组织中或小于5 x 107个酵母细胞中方便的纯化总RNA。先对样本进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy硅胶膜（参见RNeasy Mini spin column）。RNA结合到膜上（最多可结合100 µg），污染物被高效洗去。对于某些对少量DNA十分敏感的RNA应用，可在RNeasy操作过程中进行柱上DNA酶处理，去除DNA残留。之后可在30–100 µl的纯水洗脱液中得到高浓度的纯化RNA（参见RNeasy Mini procedure）。还有各种特殊应用的实验方案可供选择。
原理
RNeasy Mini Kit可从少量的样本中高效纯化总RNA。RNeasy纯化技术整合了苯酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度，简化了总RNA纯化技术。纯化得到高品质的RNA，并且DNA残留水平达到最低。
操作流程
RNeasy Mini Kit可从10–1 x 107个动物或人类细胞中、0.5–30 mg动物或人类组织中或小于5 x 107个酵母细胞中方便的纯化总RNA。先对样本进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy硅胶膜（参见RNeasy Mini spin column）。RNA结合到膜上（最多可结合100 µg），污染物被高效洗去。对于某些对少量DNA十分敏感的RNA应用，可在RNeasy操作过程中进行柱上DNA酶处理，去除DNA残留。之后可在30–100 µl的纯水洗脱液中得到高浓度的纯化RNA（参见RNeasy Mini procedure）。还有各种特殊应用的实验方案可供选择。
应用
使用RNeasy技术纯化得到的RNA的A260/280比为1.9–2.1（10 mM Tris·Cl、pH 7.5的溶液中），适用于多种下游应用，包括：
- Northern印迹、点印迹和狭缝印迹
- 终点式RT-PCR
- 定量real-time RT-PCR
- 芯片分析
- Poly A+ RNA筛选
原创作者：北京雅安达生物技术有限公司
