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ELISA试剂盒实验过程中遇到的各种疑问

点击次数:270 发布时间:2015/7/1 14:01:19
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刘**
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目前ELISA 法仍在研究当中占有着主流地位,elisa试剂盒的普遍应用使得实验更加方便、经济和准确,ELISPOT技术的优点也决定了它的发展潜力。LISPOT 法来源于ELISA,相比较传统的ELISA法有所突破,是定量ELISA技术的延伸和发展。由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同,使之在体液中不断的 被代谢或与靶器官结合,传统的酶联免疫吸附法(ELISA法)不能确切的反映体内的抗体及CK的水平。80年代,国外的科研工作者根据ELISA技术的基 本原理,建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和CK分泌细胞的固相酶联免疫斑点技术(ELISPOT)。
ELISA试剂盒实验过程中遇到的各种疑问:
1,水质原因:点复溶液验证,用娃哈哈矿泉水代替
2,实验操作原因
吸取到其它相吹干,准确的取液吹干
离心不彻底,延长离心时间
样本的污染,更换样本
乳化未处理完全,温浴(70℃)处理乳化现象
3,仪器试剂原因
离心管未清洗干净,正确的洗涤器具
有机溶剂的影响,ELISA试剂盒做试剂空白看影响结果
4,衍生化试剂原因(长时间衍生化试剂变质),更换衍生化试剂
5,与曲线好坏相关,,保证曲线的正常
ELISA试剂盒回收率
1.空白管阳性高
样本本身就是阳性样本,换阴性样本做回收率
空白管在实验中被污染,实验中防止交叉污染
水质原因用,娃哈哈矿泉水代替
2.偏 高
添加量不准确,精准的添加量
添加浓度不适合,添加合适的浓度
取液吹干量多,准确的取液吹干
取到其它相层液体,取需用相吹干
复溶液未稀释或加入量少,正确的稀释复溶液
3.偏 低
添加量不准确,精准的添加量
添加浓度不适合,添加合适的浓度
取液吹干量少,准确的取液吹干
复溶液稀释错误或加入量多,正确的稀释复溶液

原创作者:北京雅安达生物技术有限公司

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