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人内皮素-1(ET-1)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

点击次数:430 发布时间:2014/7/29 14:32:32
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刘**
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使用目的:

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中内皮素-1(ET-1)含量。

实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人内皮素-1(ET-1)水平。用纯化的人内皮素-1(ET-1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入内皮素-1(ET-1),再与HRP标记的内皮素-1(ET-1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮素-1(ET-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人内皮素-1(ET-1)浓度。

试剂盒组成

名称
96孔配置
48孔配置
备注
微孔酶标板
12孔×8条
12孔×4条
无
标准品(500 U/L)
0.5mL
0.5mL
按说明书进行稀释
标准品稀释液
6mL
3mL
按说明书进行稀释
样本稀释液
6mL
3mL
按说明书进行稀释
检测抗体-HRP
6mL
3mL
无
20×洗涤缓冲液
20mL
20mL
按说明书进行稀释
底物A
6mL
3mL
无
底物B
6mL
3mL
无
终止液
6mL
3mL
无
封板膜
2张
2张
无
说明书
1份
1份
无
自封袋
1个
1个
无

注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:500、250、125、62.5、31.2、0U/L.

操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体50μL,,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 所有孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

保存条件及有效期

1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
来源:北京雅安达生物技术有限公司
联系电话:,010-56429248/56429247
E-mail:1261299569@qq.com

原创作者:北京雅安达生物技术有限公司

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