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如何使用大鼠白介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒

点击次数:384 发布时间:2013/12/26 11:30:59
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大鼠白介素6(IL-6)elisa试剂盒

样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

大鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒

自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱

大鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒

操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

大鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒

试剂盒组成

名称
96孔配置
48孔配置
备注
微孔酶标板
12孔×8条
12孔×4条
无
标准品(1000 pg/ml)
0.5mL
0.5mL
按说明书进行稀释
标准品稀释液
6mL
3mL
按说明书进行稀释
样本稀释液
6mL
3mL
按说明书进行稀释
检测抗体-HRP
6mL
3mL
无
20×洗涤缓冲液
20mL
20mL
按说明书进行稀释
底物A
6mL
3mL
无
底物B
6mL
3mL
无
终止液
6mL
3mL
无
封板膜
2张
2张
无
说明书
1份
1份
无
自封袋
1个
1个
无

注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:1000、500、250、125、62.5、0pg/ml.

大鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒

试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

大鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒

洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

原创作者:北京雅安达生物技术有限公司

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