用elisa试剂盒检测样本的原理和步骤

用elisa试剂盒检测样本的原理和步骤

表达产物的检测

（一）真核表达产物

1、 细胞上清（分泌性蛋白）

1.2、贴壁细胞或半贴壁，直接将细胞培养上清吸出，10000rmp x10min， 取上清，-20℃或4℃保存，作为标本进行检测，如有需要可进行透析或纯化处理；

1.2、不贴壁细胞，将培养基和细胞转移至10ml离心管，500-800rmp x10min，吸取上清至另一10ml离心管中，10000rmp x10min， -20℃或4℃保存，作为标本进行检测，如有需要可进行透析或纯化处理；

2、 细胞裂解物（非分泌性蛋白）

2.1、贴壁细胞或半贴壁，直接将细胞培养上清吸出，然后用001M PBS（pH 7.4）将细胞吹下至10ml离心管，500-800rmp x10min，弃上清，沉淀转移至1.5ml离心管中， DDW重悬，置冰水浴中用超声波裂解仪进行裂解，10000rmp x10min，取上清，-20℃或4℃保存，作为标本进行检测，如有需要可进行透析或纯化处理；

2.2、不贴壁细胞，将培养基和细胞转移至10ml离心管，500-800rmp x10min，弃上清，沉淀移至另一10ml离心管中，0.01M PBS（pH 7.4）重悬，500-800rmp x10min，弃上清，沉淀移至1.5ml离心管中， DDW重悬，置冰水浴中用超声波裂解仪进行裂解，10000rmp x10min，取上清， -20℃或4℃保存，作为标本进行检测，如有需要可进行透析或纯化处理。

原创作者：北京雅安达生物技术有限公司