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HL10073乳酸脱氢酶(LDH)释放法细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒产品说明书

点击次数:147 发布时间:2016/6/13 15:32:40
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吴**
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我公司乳酸脱氢酶(LDH)释放法细胞繁殖与毒性定量检测试剂是一种旨在通过酶联连续反应系统检测由于细胞损伤导致的细胞内稳定的乳酸脱氢酶释放到细胞外,使四唑盐染料碘硝基氯化四氮唑(INT)还原为红色甲臜(farmazan),即比色法定量测定酶活性,以评价活体细胞繁殖的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种药物、化学、环境因子和营养因子处理的贴壁或悬浮生长中的动物或人体细胞。替代传统的同位素[51 Cr]释放检测的最佳选择。产品严格无菌,即到即用,简捷敏感,性能稳定,显色清晰,检测准确,重复性好。

注意事项

1. 本产品为100次(1个96孔板)操作

2. 操作时须戴手套

3. 整个操作须无菌操作

4. 建议每个样品安排3个孔,即重复3次,计算时取其平均值

5. 检测体系相应增加,试剂用量按比例相应增加:例如200微升检测体系,试剂用量增加1倍

6. 每孔中的培养液需100微升,避免使用周边培养孔(常常液体蒸发而减少)

7. 系统测试,可以加入10微升标准液(Reagent G)到50微升无细胞的细胞培养液里,然后加入反应液和显色液即可

8. 细胞裂解效果不佳,可以使用20微升裂解液(Reagent A)处理

9. 孵育时,须避光

10. 染色完成后,建议即刻检测,最迟不得超过1小时

11. 细胞培养和处理时,避免使用草酸(OXALATE),草氨酸(OXAMATE)和EDTA,否则影响检测的准确性

12. 血清含有乳酸脱氢酶,建议使用浓度不要超过1%

13. 细胞过度生长、密度过高、离心速度过大、培养箱内外温差过大等因素会造成细胞自然释放乳酸脱氢酶

14. 酚红会干扰检测

15. 样品最大酶活性对照孔或最大OD吸光读数与细胞裂解程度密切相关

16. 如果用户没有孔板离心机,则移取上清液时格外小心

17. 如果用户没有匹配的波长,可以使用波长470nm至570nm之间的任一波长替代

原创作者:上海哈灵生物科技有限公司

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