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免疫组化染色试剂盒
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简介
上海哈灵生物科技有限公司提供的美国ZYMED公司SP系列试剂盒,全称为过氧化物酶标记的链霉卵白素染色试剂盒。该方法由美国ZYMED公司于1986年首建。由于链霉卵白素的分子量是60kDa,有四个亚基可和生物素结合,等电点为6.5,所以该方法具有灵敏度高、特异性强、背景清晰、成本低廉的优点,是理想的免疫组化染色方法。
试剂盒内容
试剂(无色液体):3%H2O2去离子水 3ml、6ml或18ml
试剂A(蓝色液体):封闭用正常山羊血清工作液 3ml、6ml或18ml
试剂B(黄色液体):生物素化二抗工作液(IgG/Bio) 3ml、6ml或18ml
SP-0022:生物素标记山羊抗兔、大鼠、和豚鼠 IgG
SP-0023:生物素标记山羊抗兔 IgG
SP-0024:生物素标记山羊抗小鼠 IgG
试剂C(橙色液体):辣根酶标记链霉卵白素工作液(S-A/HRP) 3ml、6ml或18ml
标本染色
1、石蜡切片,常规脱蜡至水。
2、蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟(如需采用抗原修复,在此步骤后进行)。
3、3%H2O2去离子水(无色液体)孵育15-20分钟,以消除内源性过氧化物酶活性。
4、滴加试剂A(蓝色液体)室温孵育15-20分钟,倾去,勿洗
5、滴加适当比例稀释的一抗,37℃孵育2-3小时或4℃过夜
6、PBS冲洗,3分钟×3次
7、滴加试剂B(黄色液体),室温或37℃孵育15-20分钟
8、PBS冲洗,3分钟×3次
9、滴加试剂C(橙色液体),室温37℃孵育15-20分钟
10、PBS冲洗,3分钟×3次
11、显色剂显色(DAB或AEC)
12、自来水充分冲洗
13、如果需要,可进行复染,脱水,透明
14、选择适当的封片剂封片
保存方法:2-8℃避光保存。
原创作者:上海哈灵生物科技有限公司



