高灵敏度的全能型成像技术解读

Stain Free免染技术：

Stain Free免染技术源于2002年发表在《Analytical Biochemistry》上的一篇文章，文中指出聚丙烯酰胺中的蛋白可以进行快速检测。方法是将蛋白胶浸泡在三或中，然后通过紫外光照射。在三氯化合物存在时，紫外光会驱使色氨酸发生反应，产物会发出可见光区内的光，从而实现蛋白条带在胶上的定位。Bio-Rad公司利用了这项技术，并在其基础上进行了二次研发，开发出了Stain Free免染技术。

Stain Free免染技术主要包括两个部分：Stain Free免染胶和Chemi Doc MP全能成像系统。当然，还需要电脑和Image Lab软件。样品制备及电泳步骤与普通的电泳一样。电泳之后，取出凝胶，放置在Chemi Doc MP全能成像系统中。分离的蛋白通过特定波长的UV照射而激活，产生荧光，从而被CCD照相机捕获。1-2分钟左右，蛋白的图像就出来了，Image Lab软件还会根据蛋白marker自动估算每个蛋白条带的分子量和数量。

手灌胶不但耗费时间，而且质量难以把控，不同胶之间的重复性很差，预制胶的出现使这些难题迎刃而解。由于Laemmli系统能够分离来源于不同缓冲液体系的众多复杂样品，其被公认为SDS-PAGE技术的金标准。而传统的Laemmli系统的确定在于凝胶基质的稳定性随着时间推移而降低，所以手工制作的凝胶必须要随用随制。而商业化的Laemmli系统的预制胶通常只有几个月的保质期，而且随着时间的推移凝胶的品质不断地降低。

新的Mini-PROTEAN TGX(Tris-Glycine eXtended)预制胶PAGE基于对Laemmli系统的新型改良从而能够显著地增加凝胶基质的稳定性。TGX凝胶用标准样品和Tris/Glycine/sds电泳缓冲液并保留了类似Laemmli的分离特性，这种改良使凝胶拥有了超过12个月的保质期并且结果的重现性极好，并可以将原来的制胶和电泳过程由3个小时以上缩短到15分钟。

全能型蛋白转印系统(Trans-Blot Turbo)是一款集速度、便利性和重复性于一体，能够提供比其他现有方法更快的结果的改良版半干转印系统。这个半干式系统采用了一种新配方的转印缓冲液，并使用了一种特殊材质的滤纸。这种组合能够承受更大电流，使转印不仅更快，而且更完全。整个转印过程只需要7分钟，如果选用TGX预制胶更可缩短至3分钟。

Trans-Blot Turbo包含两个cassette，每个cassette可容纳1-2块mini胶或1块midi胶。这两个cassette是独立控制的。Trans-Blot Turbo还有着灵活的设计，可以选择预设程序帮助指导实验设计，并可根据实际需要人为修改程序并存储调用。转印过程可在无人照看下自动运行。

Bio-Rad公司的Chemi Doc MP成像系统采用Peltier冷却的高分辨率数字CCD技术，并结合了独特的宽波长紫外激发光源及高效的光学设计，能提供目前最高的检测灵敏度、均一性、灵活性及动态范围，在性能表现上可与更昂贵的以激光为基础的技术相媲美。全能型成像系统Chemi Doc MP是一台集普通成像、化学发光成像、多通道荧光成像和Stain Free免染技术于一体的全能型成像系统，具有超好的灵敏度、杰出的图像质量、无可匹敌的应用广泛性、系统操作简单快捷等优点，集功能与便捷与一身。