小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/H-2Ⅰ)elisa试剂盒使用说明书

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小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类（MHCⅠ/H-2Ⅰ）elisa试剂盒使用说明书

目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中主要组织相容性复合体Ⅰ类（MHCⅠ/H-2Ⅰ）的含量。

服务承诺：

供货期：款到发货。
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计算：

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

实验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类（MHCⅠ/H-2Ⅰ）水平。用纯化的小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类（MHCⅠ/H-2Ⅰ）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入主要组织相容性复合体Ⅰ类（MHCⅠ/H-2Ⅰ），再与HRP标记的主要组织相容性复合体Ⅰ类（MHCⅠ/H-2Ⅰ）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的主要组织相容性复合体Ⅰ类（MHCⅠ/H-2Ⅰ）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类（MHCⅠ/H-2Ⅰ）浓度。

保存条件及有效期：

试剂盒保存：2-8℃| 有效期：6个月

【小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类（MHCⅠ/H-2Ⅰ）elisa试剂盒】样本处理及要求：

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

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原创作者：上海江莱生物科技有限公司