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几种常用试剂的配制
1、抗体或免疫球蛋白稀释液0.01mol/L pH7.2PBS
| NaH2PO4.2H2O | | 0.39 g |
| Na2HPO4 | | 1.27 g |
| NaCl | | 0.85 g |
| NaN3 | | 200 mg |
| H2O (蒸馏水) | 至 | 1000 ml |
| NaCl | | 2.0 g |
| KH2 PO4 | | 0.2 g |
| Na2HPO4·12H2O | | 2.9 g |
| KCl | | 0.2 g |
| NaN3 | | 0.2 g |
| H2O | 至 | 1000 ml |
| 吐温(Tween)20 | | 0.5 ml |
| 4℃ 保存备用 | | |
3、包被液(简称CB)pH9.6
| Na2CO3 | | 1.59 g |
| NaHCO3 | | 2.93 g |
| NaN3 | | 0.2 g |
| H20 | 至 | 1000 ml |
| 密封盖好,4℃存放备用 | ||
4、ELISA底物液(可溶性底物)
| 磷酸-柠檬酸缓冲液pH 5.0 | ||
| 0.1mol/L柠檬酸(21.014g/1000ml) | 24.3 ml | |
| 0.2mol/L Na2 HPO4(28.4 g/1000ml) | 25.7 ml | |
| H2O | | 50 ml |
| 4℃存放备用 | ||
5、DAB底物液(不溶性底物,组化病理等)
| 0.05mol/L | pH7.6 Tris-HCl | |
| Tris | | 6.05 g |
| HCl(36%) | | 3.15 g(约2.7ml浓HCl) |
| HCl | 至 | 1000 ml |
| DAB为3`,3`二氨基联苯胺,不溶性底物,呈棕红色 | ||
6、DAB溶液配制:(组化及Western blot 显色)
称DAB30mg,用0.05mol/L pH7.6Trs-HCl缓冲液100ml溶解,如有沉淀,过滤后使用,一般新鲜配制使用。
用前加入1%H2O2 1~1.5ml,H202浓度为0.01%,混匀后使用。
7、3‘,3‘,5‘,5’,—四甲基联苯胺(TMB)溶液配制:
用二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)或无水乙醇,将TMB配成1%浓度,4 ℃ 保存半年以内使用。
使用前,用pH5.0磷酸—柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mgTMB)1%TMB液,再按每毫升TMB加入30% H2O2 1μl混匀后立即使用。2N H2SO4终止后,450nm测定OD值。
8、1%离子琼脂胶配制液
免疫双相扩散,单相扩散及免疫电泳中使用。
| 0.05U pH8.6巴比妥钠-HCl缓冲液 | ||
| 巴比妥钠 | | 23.8 g |
| 1mol/L HCl | | 34.5 ml |
| H2O | | 2150ml |



