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Bouin’s固定液产品简介
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固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶,抑制细菌和霉菌的生长。固定剂通过凝固,生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使,酶失活。固定剂对细胞核细胞外成分发生物理改变。未固定前活细胞被包裹在不能穿透的莫内,固定剂能够破坏这一屏障,使大分子物质穿透膜,逸出。选择固定液对组织染色和免疫组化染色都极其重要,通常将几种固定剂混合配制复合固定液,这样可以适应多种组织、细胞成分的保存,然而目前还没有一种标准的固定液适用于所有的组织、细胞成分的保存。固定液主要成分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林,醇类中的乙醇。
Bouin’s固定液(Bouin’s Fluid)主要由PA、甲醛、乙酸混合而成、PA可沉淀蛋白引起组织收缩,但不会使组织硬化,其与甲醛和乙酸混合后,穿透速度加快,固定均匀,组织收缩轻微,对细胞的微细结构显示的很清晰,为一种良好的固定液。尤其对Masson三色法等的结缔组织和肌纤维染色有媒染作用,经其固定后的组织着色鲜艳。该固定液也可能软化皮肤和肌腱,以利于切片。
操作步骤(仅供参考)
1、 按实验具体要求操作。
2、 一般仅需固定30-60min。如果组织块大,可适当延长固定时间,但不宜超过24h.
3、 用Bouin’s固定液固定后,组织可稍微流水冲洗或不冲洗直接转入70%的乙醇脱水,经乙醇脱水时可除去大部分PA,组织留有一点黄色,对染色也无影响。
注意事项:
1、 Bouin’s固定液对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作,避免吸入。
2、 组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。常规活检组织比较适合的厚度为2-4mm,一般不超过6mm.
3、 固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1.如果容积不够大,可以在固定期间更换1-3次固定液。
4、 温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
5、 取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
6、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月
原创作者:上海锐谷生物科技有限公司


