糖原PAS色染色液说明书

【产品简介】 糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，改染色试剂盒不仅能显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸（又称高碘酸）是一种强氧化剂，它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基，使之变为二醛，醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物，产生紫红色、由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质。使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间，使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化，这是很关键的步骤。

糖原PAS染色液特点是采用特有配方技术，大大增强了染色效果、性能稳定，性强操作简捷，仅需1h左右。

【产品组成】

试剂(A) 过碘酸溶液 50ml

试剂(B) Schiff Reagent 50ml

试剂（C）苏木素染色液 50ml

试剂(D) 酸性乙醇分化液 50ml

【自备材料】

1、10%福尔马林固定液。 2、蒸馏水。 3、系列乙醇。

【操作步骤（仅供参考）】1、常规固定，常采用10%的福尔马林，常规脱水包埋。

2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水；冰冻切片直接入蒸馏水。 3、自来水冲洗2-3min，再用蒸馏水浸洗2次。 4、入过碘酸溶液，室温放置5-8min,一般不宜超过10min。

5、自来水冲洗1次，再用蒸馏水浸洗2次。6、入Schiff Reagent，置于室温阴暗处浸染10-20min。7、自来水冲洗10min。8、入苏木素染色液，染细胞核1-2min。9、酸性乙醇分化液分化2-5s。10、自来水冲洗10-15min,更换蒸馏水清洗，使其返蓝。11、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明，中性树胶封固。

【染色结果】1、PAS反应呈阳性物质（糖原或多糖）：红色货紫红色。

2、细胞核：蓝色。

3、细胞质：深浅不一的红色。

备注：盐酸深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间的长短。

【阴性对照】（可选）：1、取淀粉酶1g溶解于PBS(Ph5.3)100ml,处理30-60min,与其他切片共同入过碘酸溶液。结果应为阳性。2、（备选方案）取唾液片（过滤后用）处理30-60min,与其他切片共同入过碘酸溶液。结果应为阴性。3、（备选方案）如果对照片采用其自身样本，对照片不经过碘酸溶液这一步，直接入Schiff Reagent。结果应为阴性。

【注意事项】1、切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。2、过碘酸氧化时间不宜过久，氧化时的温度以18-22℃最佳。3、过碘酸溶液和Schiff Reagent应置于4℃密闭保存，使用时避免接触过多阳光和空气。使用前，最好提前30min取出恢复到在室温，避光暗处使用。4、酸性乙醇分化液应经常更换新液，其分化时间应该依据切片厚薄、组织的分别和分化液的新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够。5、在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间非常重要，该依据切片厚薄，组织的类别等决定。6、本染色液常用于常规组织切片染色，对于真菌，细胞，及其薄的切片，建议采购糖原PASr染色试剂盒（细胞真菌专用），因为其过碘酸溶液和苏木素溶液浓度更低，不宜过染。

7、冷冻切片染色时间尽量要短。8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作，

原创作者：上海锐谷生物科技有限公司