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鼠肝癌细胞系

鼠肝癌细胞系

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更新日期:2025/11/30 0:26:52

生 产 地:中国大陆

产品型号:

简单介绍:MM45T.LI鼠肝癌细胞系RPMI 1640

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详细内容

鼠肝癌细胞系 详细资料:

来源:
为鼠科动物褐家鼠、黑家鼠等的肝。
目的:
观测中药肝复健冲剂对二乙基亚硝胺(DEN)诱导大鼠肝纤维化形成的影响.
方法:
建立DEN诱导大鼠肝硬化模型,同时给予肝复健冲剂进行干预,应用天狼红苦味酸特染法、免疫组化染色法及计算机图像分析技术检测中药对DEN致大鼠肝纤维化过程胶原沉淀及肝细胞增殖特性的影响.
1材料和方法:
1.1材料SD雄性大鼠,体质量150~180 g,由第四军医大学实验动物中心提供. 二乙基亚硝胺(DEN)购自Sigma公司. 天狼红(解放军第475医院赠送). PCNA检测试剂盒购自DAKO公司. 中药饲料:肝复健冲剂按30.4 g?kg-1均匀混合于基础饲料中压制而成(第四军医大学实验动物中心提供).   1.2方法   1.2.1模型建立大鼠适应环境3 d随机分为模型组(Model)及中药组(Ganfujian,GFJ),每组各30只,分别以0.1 g·L-1 DEN自由饮水,同时分别给予基础饲料或含中药的饲料喂养. 16 wk时停用DEN饮水及中药饲料. 考虑到造模过程大鼠有一定死亡率,分别于建模开始后每4 wk两组各处死5只大鼠,剩余大鼠留继续观察. 取肝组织固定于100 g·L-1甲醛溶液,石蜡包埋,切片厚4 μm. 常规HE染色、切片胶原特殊染色及免疫组化染色.   1.2.2切片胶原染色按天狼红饱和苦味酸法[4]. 普通石蜡切片,厚4 μm;常规脱蜡至水,0.1 mol?L-1天狼红饱和苦味酸,避光室温孵育20 min;不洗,950 mL?L-1乙醇脱水,二甲苯透明,封片.   1.2.3PCNA免疫组织化学染色取材肝组织固定于100 mL?L-1缓冲甲醛溶液24 h,常规石蜡包埋,切4 μm厚切片,二甲苯、梯度乙醇脱蜡至水;染色方法为免疫ABC法. 以0.1 mol?L-1 PBS 取代一抗作阴性对照,以正常大鼠肝组织作正常对照.   1.2.4染色结果判定及计算机图像分析肝脏背景为淡黄色,胶原阳性着色呈红色, 采用HPIAS1000高清晰度彩色病理图文分析系统,随机选择5个汇管区进行染色胶原的定量分析(面积占视野面积),取其均值. PCNA阳性着色为覆盖胞核的棕黄色颗粒. 用网格(10×10)测试法计数阳性肝细胞. 切片各选择10个按同一方向移行、不重叠的高倍镜视野(×40),记数阳性及阴性细胞数(100个细胞).

英文名称 中文名称 培养液
MM45T.LI 鼠肝癌细胞系 RPMI 1640
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B01082 人结肠癌细胞 HT-29
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