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什么是琼脂扩散试验及原理
琼脂扩散试验又称免疫扩散反应或凝胶沉淀反应,基本原理是可溶性抗原和相应抗体在含有电解质的琼脂凝胶中扩散相遇,特异性地结合形成肉眼可见的线状沉淀物的一种免疫血清学技术。
琼脂凝胶的含水量极大,常用琼脂凝胶(1%~1.2%)含水98%以上,可使分子量20万以下的大分子物质自由通过。由于大多数抗原和抗体的分子量都在20万以下,所以能在琼脂凝胶中自由扩散。当抗原和抗体相应且比例适当,两者相遇就会出现一条沉淀线。一对抗原和抗体,形成一条沉淀线,故可应用琼脂扩散试验鉴定抗原和抗体成分、抗体的纯度、抗原或抗体的相对效价等。
接触和扩散于其中者,称为单相扩散,也称辐射扩散或环状沉淀试验;使抗原和抗体双方同时在琼脂凝胶中扩散而相遇成线者,称为双向扩散。由于琼脂扩散试验的操作简便,不需要特殊设备,且有较好的特异性和检出率,故已成为一种广泛应用的免疫学技术。在动物病毒学中广泛用于检测病毒抗原和毒型鉴定。应当指出,由于家禽免疫球蛋白的特殊性,琼脂凝胶中的NaCl含量应为8%,而不是通常的0.85%,使用这样的浓度可取得更好的结果。
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