抗血清的制备过程（一）

抗血清的制备过程（一）

抗血清（antiserum）是一种含有多克隆抗体的血清。通过注射抗血清可以传递被动免疫（passive immunity）治疗许多疾病。目前唯一能够治疗埃博拉病毒患者的方法就是通过注射前一个患者的抗血清到体内.

1、动物的选择

　　羊、马、鸡、猴、豚鼠，都是常用的免疫动物，在实验中，选择动物时应考虑抗原与动物的种属关系、抗原性质与动物种类、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及动物个体等因素。免疫用动物应选适龄、健壮．最好为雄性。最常用的实验动物是家兔，一般选择选择年龄在6个月以上当年繁殖的♂性，体重2 ～3公斤，健康家兔三只，免疫前用金属编号牌固定兔耳，或用染料涂沫在动物的背部，作出明确的标记。

2、抗原制备

　　1）抗原稀释：用灭菌生理盐水将抗原稀释为2mg/ml，于免疫前一天加入溶液，使每毫升抗原溶液含青霉素1000 UI，链霉素1000 UI，放4℃过夜（一般可不加青、链霉素）次日取出，与佐剂混合制成乳剂后用于动物免疫。

　　免疫原的注射剂量应考虑其抗原性的强弱、分子量大小、动物的个体状态和免疫时间。对于纯的可溶性抗原的免疫剂量，通常小鼠首次抗原剂量为50～100μg/次，大鼠为100～200μg/次，兔为100μg ～1 mg/次，合成免疫原为2 mg（半抗原约为20～200μg），一般需要与等量的福氏完全佐剂混合。加强免疫的剂量为首次计量的1/2，通常用不完全福氏佐剂或不用佐剂。如需制备高度特异性的抗血清，可选用低剂量抗原短程免疫法；反之，欲获得高效价的抗血清，宜采用大剂量抗原长程免疫法。

　　2）佐剂和抗原乳剂的配制

　　1佐剂的配制：福氏完全佐剂（Freund’s complete adjuvant），各实验室的配方不尽相同，我室采用的配方如下：

　　医用液体石腊 20毫升

　　羊毛脂 12克

　　水浴溶化、混匀，分装于青霉素小瓶，用纱布、线绳扎紧瓶塞。8磅20分钟灭菌，4℃保存备用。于免疫前准备抗原乳剂制备时，以活卡介苗（有时亦用死卡介苗）代替死结核菌，每毫升试剂中加入10mg活卡，即为福氏完全佐剂。

原创作者：上海泛柯实业有限公司