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免疫球蛋白G(IgG)elisa试剂盒的分析
点击次数:354 发布时间:2013/3/7 16:22:32
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人体免疫球蛋白G(IgG)elisa试剂盒的分析
人免疫球蛋白G(IgG)elisa试剂盒组成及试剂配制:
1.酶联板(Assayplate):一块(96孔)
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)
3.样品稀释液(SampleDiluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibodyDiluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidinDiluent):1×10ml/瓶
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1
7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100
8.底物溶液(TMBSubstrate):1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液(WashBuffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍
10.终止液(StopSolution):1×10ml/瓶(2NH2SO4)。
细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
血浆: 应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入10%(v/v)抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1%heparin或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
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