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革兰氏细菌染色液使用说明书

点击次数:707 发布时间:2012/7/9 9:05:35
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革兰氏细菌染色液使用说明书
临床应用:用于革兰氏细菌分类形态观察前的染色。主要应用于细菌分类和鉴定,革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法。
适用范围:适宜石蜡切片、涂片等染色。
产品组成:
结晶紫染色液:100ml
卢戈氏碘染色液:100ml
95%乙醇:100ml
品红复染液:100ml
染色方法:
涂片固定水洗后的或石蜡切片脱蜡水洗后:
1、结晶紫染色液染色1~2分钟,水洗;
2、卢戈氏碘液,媒染1分钟,水洗;
3、95%乙醇脱色20—25秒至流出液无色,水洗;
4、品红复染液2~3分钟,水洗;
5热风吹干或烘干切片、中性胶封固、置油镜镜检。
结果参考:革兰氏阴性菌呈现粉红色或红色;革兰氏阳性菌呈现紫色,或更深的蓝黑色。
有效期:十二个月。
贮 存:常温保存。
体会和说明:
1、革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影响,难以严格规定。
2、染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后,应吸去玻片上的残水,以免染色液被稀释而影响染色效果。
3、选用幼龄的细菌。G+菌培养12h-16h,E.coli培养24h。若菌龄太老,由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。
4、染色时用已知的阳性片同染作对照。
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原创作者:上海亿欣生物科技有限公司

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