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小鼠D1(Cyclin-D1)elisa试剂盒使用说明书细胞周期素

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上传时间:2012/11/1 8:48:29

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上 传 者:上海时代生物科技有限公司

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本公司主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务,满足生物化学、分子生物学、细胞生物学、免疫学等生物科技实验需求。欢迎您来电咨询!

小鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)elisa试剂盒使用说明书

Elisa kit规格:48孔配置/96孔配置

标准品稀释液:1.5ml×1瓶

酶标试剂:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)

【小鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用

试剂盒组成:

封板膜:2片(48)/2片(96)   

说明书:1份          

密封袋:1个

标准品:   2700ng/L  0.5ml×1瓶   0.5ml×1瓶  2-8℃保存            

酶标包被板:  1×48        1×96             2-8℃保存

样品稀释液: 3ml×1瓶       6 ml×1瓶         2-8℃保存

显色剂A液: 3ml×1瓶       6 ml×1瓶         2-8℃保存

显色剂B液: 3ml×1瓶       6 ml×1瓶         2-8℃保存

终止液:     3ml×1瓶       6ml×1瓶          2-8℃保存

浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶   (20ml×30倍)×1瓶   2-8℃保存

实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)水平。用纯化的小鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入细胞周期素D1(Cyclin-D1),再与HRP标记的细胞周期素D1(Cyclin-D1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的细胞周期素D1(Cyclin-D1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)浓度。

目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中细胞周期素D1(Cyclin-D1)的含量。

【小鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)elisa试剂盒】样本处理及要求:

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

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