液相色谱

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1）、了解待分离化合物样品结构信息：手性方法建立的第一步为检查待测物的化学结构，尽可能地获取样品的如下信息——在不同溶剂中的溶解度（由于是制备分离，我们期望尽量多的样品溶于相对小的溶剂中。除了分离选择性，样品溶解度通常是建立PreparativeChiralHPLC方法的主要障碍。许多情况下，样品因在流动相中没有足够大的溶解度，因而影响单针上样量，更甚至于沉积于制备柱上而无法洗脱。）；形成氢键H-、π键或者偶极相互作用的能力；是否有极性官能团（是否含氨基NH2-、羧基-COOH或者既含酸性基团又有碱性基团）；手性中心附近有无大取代基；紫外光谱可否检测等。诸如此类的样品结构信息对预判手性分离能力及手性固定相的选择有较大的帮助作用。

2）、怎样选择合适的手性柱：由于手性方法是用于制备分离，在选择手性柱时就应考虑柱容量（柱样品荷载量）。从手性固定相通用性考虑，各商品化的手性柱通用性大致顺序为：多糖柱﹥蛋白柱﹥糖肽柱﹥配体交换柱。

多糖类手性固定相基于其独特的分子结构特征在手性分离方面显示出卓越的性能，已经广泛用于各种各样手性分子对映体的分析和制备分离。所以，选定多糖柱作为制备分离用手性柱。

3）、手性色谱条件优化：手性液相色谱法，与普通液相色谱类似，方法建立时主要包括手性柱的筛选和流动相条件的优化两个方面。

手性柱筛选方面，即便是在选定多糖类手性柱的情况下，由于有多种柱型可供选择，以致于难于确定最好以哪一种柱子开始实验。据已报导的大部分应用研究，Daicel公司“四大金刚”淀粉类ChiralpakAD-H、ChiralpakAS-H和纤维素类Chiralcel-OD-H、ChiralpakOJ-H联合使用可成功分离80%未知样品。但依据个人经验，最英明神武的决策是重用“两大护法”-ChiralpakAD-H和Chiralcel-OD-H（或者新型共价键合手性柱ChiralpakIA和ChiralpakIC），这两者在多糖类手性柱中应用最为广泛，可用于多种结构类型样品的分离。直链淀粉的螺旋结构和纤维素的线性结构，在对映体拆分方面具有手性分离互补特征，ChiralpakAD-H和Chiralcel-OD-H（或者ChiralpakIA和ChiralpakIC）配合使用，优势互补，珠联璧合，大大的好。。。