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人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)elisa试剂盒使用说明书

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上传时间：2012/9/5 9:39:48

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上传者：上海将来试剂有限公司

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上海将来试剂专业经销众多国际生命科学领域的知名品牌ELISA试剂盒，公司产品经过不断优化、创新，赢得了国内众多科研工作者的信赖和支持, 并指定为Elisa试剂盒长期供应商,欢迎来电咨询!

人可溶性磷脂酶A2（sPL-A2）elisa试剂盒使用说明书

Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置

标准品稀释液：1.5ml×1瓶

酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）

【人可溶性磷脂酶A2（sPL-A2）elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用

计算：

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

试剂盒组成：

封板膜:2片（48）/2片（96）

说明书:1份

密封袋:1个

标准品： 2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存

酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存

样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

终止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存

浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存

实验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人可溶性磷脂酶A2（sPL-A2）水平。用纯化的人可溶性磷脂酶A2（sPL-A2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入可溶性磷脂酶A2（sPL-A2），再与HRP标记的可溶性磷脂酶A2（sPL-A2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的可溶性磷脂酶A2（sPL-A2）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人可溶性磷脂酶A2（sPL-A2）浓度。

目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中可溶性磷脂酶A2（sPL-A2）的含量。

操作步骤

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。